关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)   基因工程疫苗   感染性克隆   外源基因  

摘要： 自美国（1987）和欧洲（1990）首次分离猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）以来，该病毒在全球流行已超过30年。直至今日，PRRSV仍然不断变异和进化，在我国的流行态势尤其复杂，在后非洲猪瘟时代仍然是影响养猪业的最具经济意义的病原体之一。目前，市售疫苗包括传统灭活病毒疫苗（KV）和改良活病毒疫苗（MLV）。然而，PRRSV的疫苗预防和控制尚未完全实现。当前迫切需要开发一种安全、有效、通用的基因工程疫苗。基于PRRSV感染性克隆反向遗传平台表达外源基因，包括标记基因、免疫增强基因或其他病毒抗原基因，构建重组PRRSV疫苗、基因缺失疫苗、广谱通用疫苗等成为了研究的热点。在此，我们综述了近年来PRRSV作为病毒活载体表达外源基因的研究进展及其在新型基因工程疫苗开发中的潜在应用前景。

关键词： 病原体   基因工程技术   亚单位疫苗   病毒载体疫苗   核酸疫苗  

摘要： 疫苗接种被认为是控制病原体和预防人类以及动物疾病最有效的方法之一.近年来由于病毒性疾病来势汹汹,传统疫苗如灭活或减毒活疫苗的局限性及潜在问题日益突显,而基因工程技术的进步使得疫苗设计和研发得以改进,由此衍生的病毒类基因工程疫苗作为下一代疫苗越来越受到研究者的高度关注.通过病毒类基因工程疫苗的类型,重点介绍不同疫苗的开发原理、特点及用途,探讨其应用前景和发展趋势,旨在为新发病毒类疾病疫苗的研发提供参考.

关键词： 禽流感   流行病学   诊断   基因工程疫苗   防控措施  

摘要： 禽流感是由A型流感病毒引起的人畜共患传染病,在我国被列为Ⅰ类传染病,临床症状表现为咳嗽、喷嚏、呼吸困难、啰音、颜面部水肿、冠和肉髯发绀、腹泻和神经紊乱、角质鳞片出血、蛋鸡产蛋量和蛋的品质下降等,传染性强,死亡率高,给养禽业造成巨大经济损失。对该病的防控主要采取综合性措施,结合该病的流行病学特点,通过外防输入杜绝传染源,结合科学合理规划养殖场、加强饲养管理、建立健全疫情防控制度、疫苗免疫接种,来切断传播途径和增强家禽自身抵抗力,最大程度降低禽流感的发生率,保障养殖业的健康发展。

关键词： 基因工程疫苗   动物疾病   防治   前景  

摘要： 随着生物科技的不断革新,动物疫病的防治手段也越来越多,但在兽医临床当中,疫苗仍然是重要的防护手段。传统疫苗的研制受到微生物体外培养以及安全性等多方面的限制,在使用中存在着较大的风险,而随着现代生物技术和手段的发展,利用基因工程技术研发的疫苗,具有更高的安全性和稳定性,同时还具备大批量生产的可能性,进一步降低了生产的成本,是未来动物疾病防治的主流发展趋势。本文对基因工程疫苗进行了简单的阐述,同时分析了基因工程疫苗所具有的优势和劣势,以及当前的应用现状,并就此分析了其在动物疾病防治当中的发展前景,以供相关人士参考。

关键词： 猪圆环病毒(PCV)   基因工程抗体   猪源化改造   真核表达  

摘要： 猪圆环病毒2d型(Porcine circovirus type 2d,PCV2d)是猪圆环病毒的一个主流亚型,是引起断奶仔猪(Sus scrofa)多系统衰竭综合征等猪免疫抑制相关疾病的重要病原,严重危害着我国养猪业的健康发展。目前报道的PCV2d中和表位均位于衣壳蛋白(capsid protein,Cap)上,Cap是产生中和抗体的关键蛋白,其中和抗体能够与病毒结合,从而阻止PCV2d的感染。本研究首先通过原核表达、纯化获得PCV2d Cap重组蛋白,并免疫BALB/c小鼠(Mus musculus),筛选得到了2株鼠源抗PCV2d Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B3和1B4,其中1B3具有中和活性且不与其他病毒发生交叉反应。将1B3抗体可变区基因与猪源恒定区基因嵌合后克隆至真核表达载体中,利用中国仓鼠(Cricetulus griseus)卵巢CHO-S细胞制备1株PCV2d Cap蛋白重组猪源化嵌合抗体r1B3swine稳定表达细胞系。抗体功能验证和Western blot结果显示,r1B3swine与PCV2d病毒结合反应良好,并且不与抗鼠二抗发生交叉反应。综上所述,本研究构建的猪源化抗PCV2d Cap蛋白的单克隆抗体r1B3swine的真核表达体系,为研究PCV2d Cap蛋白的结构、功能及为PCV2研发新的治疗和诊断制剂提供物质基础。

关键词： 小反刍兽疫   小反刍兽疫病毒   聚合酶链反应   基因工程疫苗  

摘要： 小反刍兽疫是一种由小反刍兽疫病毒引起的急性传染疾病,病死率高,可超过90%,对全球动物卫生和公共卫生安全造成威胁。世界动物卫生组织将小反刍兽疫规定为必须报告的动物疫病,我国将其列为一类传染病。文章介绍小反刍兽疫病原学、流行病学特征以及临床症状,总结近年来临床常用的诊断及防治方法,以期为小反刍兽疫的临床诊断及防治提供参考。

关键词： 大豆育种   育种方法   辐射诱变育种   基因工程育种   多倍体育种   育成品种   分子育种   选择育种  

摘要： 1大豆育种方法如今大豆育种常用的方法较多,包括传统的选择育种和随着生物技术的高速发展逐渐形成的分子育种。传统育种方法有系统育种、杂交育种、辐射诱变育种(也称物理诱变育种)和化学诱变育种。从遗传学的角度来说,目前,大豆常用的育种方法有单倍体和多倍体育种,有性杂交育种、生物基因工程育种和各种诱变育种。传统的育种方法帮助农业科技人员选育出许多优良的大豆品种。近年来,逐渐兴起了诱变育种和分子育种,成为改良大豆种质资源和加快大豆遗传育种效率的重要方式。

关键词： 动物基因工程技术   动物遗传育种   应用现状   发展前景  

摘要： 动物基因工程技术利用先进的生物技术手段对动物基因进行编辑和改造,以达到改良动物品种、提高生产性能、增强适应力等目的。随着科学技术的不断进步,动物基因工程技术在动物遗传育种领域的应用现状和发展前景备受关注。因此,文章对动物基因工程技术在动物遗传育种领域的应用现状与发展前景进行研究,以期能为未来的动物遗传育种研究和实践提供一些指导。

关键词： 基因工程药物   生物制药   血液制品   生产车间   基因工程疫苗   现代生物技术   诊断试剂   附属设施  

摘要： 项目内容和规模:项目占地50亩,主要建设生产车间、仓库、行政办公室、研发中心及附属设施等。运用现代生物技术生产用于人类疾病预防、诊断、治疗的医药产品,包括基因工程药物、基因工程疫苗、新型疫苗、诊断试剂(盒)、微生态制剂、血液制品及代用品等。项目建成后,年产值12亿元,税收5000万元。

关键词： 产肠毒素大肠杆菌   灭活疫苗   融合基因   表达  

摘要： 目的利用PCR和基因定点突变技术,分别扩增出K88ac、K99、LTB和突变的ST1基因,构建了重组菌株BL21(DE3)(pXKKSL4),酶切鉴定和序列分析表明构建的pXKKSL4表达载体包含有K88ac-K99-3ST1-LTB融合基因且阅读框架正确。方法SDS-PAGE分析表明融合蛋白占菌体总蛋白含量的35.72%。ELISA检测证实融合蛋白能与ST1单抗、LTB、K88ac和K99抗体相结合。结果乳鼠灌胃实验表明K88ac-K99-3ST1-LTB融合蛋白已失去ST1天然毒性,免疫保护试验表明菌株氢氧化铝佐剂苗和包涵体粗提物氢氧化铝佐剂苗均具有良好的免疫效果,其免疫保护率分为98%和96%。结论上述研究表明构建的四价灭活疫苗不但解决了ST1肠毒素毒性问题,而且又赋予其免疫原性,同时增加K99菌毛可使免疫效果进一步增强,这样从肠毒素和菌毛两种途径,达到预防由ETEC引起的腹泻目的,从而有效控制腹泻的发生,为将来制备产肠毒素大肠杆菌基因工程灭活疫苗打下坚实基础。