关键词： 肿瘤免疫疗法   抗癌基因   基因工程疫苗   树突状细胞   淋巴细胞   淋巴组织肿瘤  

摘要： 目的：探讨WT1基因在淋巴组织肿瘤患者中表达情况及其临床意义。 方法；采用RT-PCR方法检测40例淋巴组织肿瘤患者及10例非恶性血液病患者、正常人外周血或骨髓单个核细胞WT1mRNA表达情况。 结果：10例非恶性血液病患者、正常人未检测到WT1基因的表达。16例急性淋巴细胞白血病患者阳性13例(81.2％),4例慢性淋巴细胞白血病患者未测到WT1基因的表达,20例实体非霍奇金淋巴瘤患者中I、II、III期患者未检测到WT1基因的表达,9例IV期患者中阳性5例(55.6％)。对患者动态观察,发现当完全缓解时,WT1表达水平明显下降,复发时WT1表达又升高。 结论:RT-PCR检测WT1基因的表达可作为急性淋巴细胞白血病微小残留病的检测指标；WT1基因随着实体淋巴瘤病情进展可有表达,可以指导分期及治疗。

关键词： 兽药行业   生鲜牛奶   生物化工   基因工程疫苗   奶牛   北京伟嘉集团   畜牧兽医   英特   奶业生产   原种猪   专家组   企业   企业管理  

摘要： 武汉中博生化拟建远程视频网未来3年在全国各大型猪场建1000个远程视频诊断服务终端,为猪看病。武汉农企中博生化公

关键词： 新疆畜牧科学院兽医研究所   动物寄生虫病   进行性肺炎   王进   专家   细粒棘球绦虫   基因工程疫苗   羊棘球蚴   羊场   绵羊   疫病防治   口蹄疫   牲畜五号病   病毒病   畜牧  

摘要： 王进成,男,汉族,1945年7月3日出生。1967年毕业于北京农业大学(中国农业大学)兽医系兽医专业,1970年大学毕业分配到新疆吐鲁番县兽医站工作、后任副站长,1981年调任新疆畜牧科学院兽医研究所工作,1986年任新疆畜牧科学院南山试验种羊场党委书记,1990年任新疆畜牧科学院兽医研究所所长,1992年任新疆畜

关键词： 口蹄疫病毒   牛疱疹病毒Ⅰ型   DNA疫苗   重组伪狂犬病毒   VP22基因   P1基因   P1/2A/3C基因  

摘要： 口蹄疫(Foot and Mouth Disease FMD)是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth DiseaseVirus FMDV)引起的偶蹄动物急性、热性、高度接触性传染病,是危害畜牧业最严重的传染病之一,也是造成家畜及其产品国际贸易受阻的重要疾病,被国际兽医局(OIE)和联合国粮农组织(FAO)在国际动物卫生法典中列为18种A类传染病之一,近年又被列为重大跨国动物疫病的全球消灭计划及生物武器安全公约组织重点检查对象。中国政府公布的《动物病原微生物分类明录》将口蹄疫病毒列为十种一类动物病原微生物之一。FMDV属于小RNA病毒科(Picornaviridae)口蹄疫病毒属(Aphthovirus),有七个血清型,分别为A、O、C、Asia1和南非SAT1、SAT2、SAT3,每种血清型里又可分为许多亚型,不同血清型之间没有交叉保护力,其中O型口蹄疫分布最广,在非洲、南亚、中东和南美许多国家广泛分布,在我国的口蹄疫病例大多都是O型口蹄疫。免疫预防接种是控制乃至消灭口蹄疫的主要措施,目前使用O型口蹄疫灭活疫苗预防该病,取得了一定的效果,但是仍需改进。 本研究以伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)基因缺失株TK/gE/LacZ为载体,融合表达具有免疫增强作用的牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型FMDV的主要抗原基因P1或P1/2A/3C,构建了基因工程二价疫苗株,达到一针预防两种疾病的目的。同时以pcDNA3.1(+)为载体构建了DNA疫苗pcDNA-VP22-P1和pcDNA-VP22-P1/2A/3C。用Balb/c小鼠模型比较了重组病毒TK/gE/VP22-P1、TK/gE/VP22-P1/2A/3C和DNA疫苗pcDNA-VP22-P1和pcDNA-VP22-P1/2A/3C及猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果。 1.牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因、O型口蹄疫病毒P1和P1/2A/3C基因的克隆与序列分析 为了将VP22基因分别与FMDV的P1基因和P1/2A/3C基因的5’端按照正确的阅读框架融合,首先设计一对分别含有HindⅢ和EcoRⅤ酶切位点的上、下游引物,从含有牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因的重组质粒中扩增出不含终止密码子的牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因编码区;再用分别含有EcoRV和XbaⅠ酶切位点的上、下游引物,从含有O型FMDV P1基因和P1/2A/3C基因的重组质粒中分别扩增出不含起始密码子的P1基因和P1/2A/3C基因;将扩增的VP22基因、P1基因和P1/2A/3C基因,分别克隆到pMD18-T载体,获得重组质粒pMD18-T-VP22、pMD18-T-P1和pMD18-T-P1/2A/3C。DNA测序结果表明,三个基因的序列与已经公布的序列完全一致。 2.共表达牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒主要免疫原性基因的DNA疫苗的构建及其免疫原性的效果 用HindⅢ和EcoRⅤ酶切pMD18-T-VP22后,凝胶回收VP22基因,并定向克碌秸婧吮泶镏柿cDNA3.1(+)的HindⅢ和EcoRⅤ酶切位点之间,获得重组质粒pcDNA-VP22;将pMD18-Y-P1和pMD18-T-P1/2A/3C分别用EcoRⅤ和XbaⅠ酶切后凝胶回收,回收片段分别定向克隆到pcDNA-VP22的EcoRⅤ和XbaⅠ酶切位点之间,使其与VP22的3’端融合,分别获得重组表达质粒pcDNA-VP22-P1和pcDNA-VP22-P1/2A/3C。然后用Balb/c小鼠模型评价了pcDNA-VP22-P1和pcDNA-VP22-P1/2A/3C两种DNA疫苗及本实验室以前构建的不含VP22的DNA疫苗pcDNA-P1和pcDNA-P1/2A/3C的免疫效果。结果显示,首免后14天和28天,四种DNA疫苗均产生了可以检测到的FMDV ELISA抗体和中和抗体;含VP22的DNA疫苗(pcDNA-VP22-P1、pcDNA-VP22-P1/2A/3C)的抗体水平在二免后显著高于不含VP22的DNA疫苗(pcDNA-P1、pcDNA-P1/2A/3C)(P＜0.05);DNA疫苗与FMDV灭活疫苗联合免疫的抗体水平显著高于DNA疫苗单独免疫(P＜0.05),但与FMDV灭活疫苗单独免疫没有显著差异(P＞0.05)。淋巴细胞增殖试验结果显示,DNA疫苗诱导细胞免疫的水平远远高于FMDV灭活疫苗(P＜0.05)。 3.共表达牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒多抗原表位的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫应答 利用通用转移载体pIECMV,构建了转移载体pIECMV-VP22-P1和pIECMV-VP22-P1/2A/3C。以PRV TK/gE/LacZ为亲本株,分别构建了融合表达VP22-P1和VP22-

关键词： 药效学评价   蛋白药物   治疗性   药动学   小分子药物   基因工程药物   基因工程抗体   物理化学性质  

摘要： 治疗性蛋白药物是一类用于治疗的高分子物质(＞1 kDa),可分为多肽和基因工程药物、单克隆抗体和基因工程抗体、重组疫苗等.与小分子药物相比,其具有高活性、特异性强、低毒性、生物功能明确、有利于临床应用的特点.

关键词： 猪圆环病毒   灭活疫苗   弱毒疫苗   基因工程疫苗  

摘要： 猪圆环病毒2型主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征,在包括中国在内的各养猪国家广泛流行,造成严重的经济损失,受到国内外学者的高度重视,对此病的研究特别是对其疫苗的研究正日益受到关注。文章就猪圆环病毒2型的灭活疫苗、弱毒疫苗和基因工程疫苗的研究进展做了详细的阐述。

关键词： 中国农科院   动物疫苗   兰州   世界   基因工程疫苗   口蹄疫疫苗   猪口蹄疫   研究所  

摘要： 本刊讯 中国农科院兰州研究所研制的口蹄疫疫苗。由中国农科院兰州兽医研究所参与合作完成的猪口蹄疫0型基因工程疫苗，

关键词： 幽门螺杆菌   基因工程疫苗   抗原基因   表达系统  

摘要： 幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）感染是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的主要病因，与胃腺癌、B细胞淋巴瘤的发生亦密切相关。世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）已将Hp列为Ⅰ类致癌因子。流行病学调查显示，全世界成年人口约50％携带该菌。现有的根除却的手段主要是联合应用抑酸剂及2或3种抗生素，但却感染的普遍性、耐药菌株的不断增加、药物价格的昂贵以及患者的低依从性等限制了抗菌疗法的成功使用。

关键词： 乙型肝炎病毒表面抗原   IgG   基因工程抗体   杆状病毒   表达   纯化  

摘要： 目的对人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体进行表达、纯化及初步鉴定。方法用含Fc片段抗-HBsAg Fab抗体基因的载体pAC-HBs-Fc,与杆状病毒线性DNA共转染昆虫细胞sf9,产生重组抗-HBsAg的全抗体。以不同浓度的HBsAg包被酶标板孔,用间接ELISA法检测培养上清中抗体的表达及特异性;用蛋白G亲和层析柱进行抗体的纯化,并对纯化的抗体进行SDS-PAGE、Western blot和竞争性ELISA分析。结果上清中表达的重组IgG抗体仅与HBsAg呈阳性反应,特异性良好,纯化后其纯度达97.1%。经SDS-PAGE和Western blot分析可见,IgG抗体轻链和重链的相对分子质量分别约为27000和55000,为人源IgG抗体。CHO表达的HBsAg和血源性HBsAg能竞争性抑制该重组IgG抗体与***表达的HBsAg反应,其抑制率分别为55.9%和81.9%。结论人源抗乙型肝炎病毒表面抗原的基因工程IgG全抗体可在杆状病毒载体表达系统中成功表达。

关键词： 基因工程抗体   抗病毒感染   中国疾病预防控制中心   应用   基础   生命科学技术   生物工程   免疫球蛋白  

摘要： 由中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所主持的“抗病毒人源基因工程抗体的基础和应用研究”，属于生命科学技术领域中预防医学和生物技术研究领域。作为一类新兴起的生物工程药，抗病毒人源基因工程抗体以其对人体无免疫原性，无污染源，特异性抗病毒疗效及连续规模生产可行性等优势逐渐成为预防和治疗病毒性疾病的一类可替代血源性免疫球蛋白的新型抗病毒感染生物工程药。主要研究内容包括以下三大方面：