关键词： 基因工程疫苗   研究进展   生物安全  

摘要： 基因工程疫苗的研究发展日新月异,已从理论研究进入到实际生产应用,成为生物制品产业发展的一种趋势。文章就兽用基因工程疫苗的种类和研究进展,及在应用基因工程疫苗过程中可能出现的潜在生物安全问题作一简要概述。

关键词： 基因工程抗体   科学家   合成   异性   医学   转化   研究人员   基因科技  

摘要： 来自美国基因科技公司（GENENTECH INC．）的研究人员在新研究中绕过抗体合成的常规法则，合成了一种能够通过血脑屏障的且具有双特异性的新型基因工程抗体。这一新技术或可在将来推动科学家们开发出基于抗体的脑病治疗新方法。研究人员在5月25日的《科学一转化医学》（Science Translational Medicine）同时发表了两篇文章，详述地描述了这一抗体的设计过程。

关键词： 绿脓杆菌外毒素A(PEA)   结构   功能   提取   纯化   重组毒素   基因工程疫苗   应用  

摘要： 在免疫缺失、囊肿性纤维化、烧伤烫伤等患者的临床继发感染中,绿脓杆菌是引起感染的主要病原菌之一,其合成的细胞外毒性物质—绿脓杆菌外毒素A(PEA)被认为是引起感染的最关键内在机制。该文对中外学者们在PEA的结构、功能、提取和纯化方法、重组毒素、基因工程疫苗以及应用等方面的研究进行归纳总结,并对研究和应用中存在的问题加以分析,对预防和治疗绿脓菌感染、抗肿瘤、抗移植排斥和治疗自身免疫性疾病等具有重要而深远的意义。

关键词： 流行性乙型脑炎   核酸疫苗   乙型脑炎病毒   减毒活疫苗   中枢神经系统   基因工程疫苗   生物技术开发   怀孕母猪  

摘要： 流行性乙型脑炎（epidemic encephalitis）是由黄病毒科（flaviridae）黄病毒属乙型脑炎病毒引起的一种严重威胁人畜健康的急性中枢神经系统传染病，是重要的人畜共患病及虫媒病毒病。该病对猪的致死率不高，但能引起怀孕母猪发生流产、产死胎和木乃伊胎，公猪发生睾丸炎，育肥猪持续高热，仔猪常呈脑炎症状，对养猪业危害严重。目前，预防乙型脑炎病毒感染的疫苗有灭活疫苗和减毒活疫苗，但灭活疫苗存在注射剂量大、效果不稳定、免疫力不持久等不足；我国研制的减毒活疫苗虽然保护性好，但活苗有可能出现毒力反强、带毒、排毒、垂直传播、核酸重组等现象，而且通过常规的血清学方法检查一般与自然感染无法区分；因此，人们设法利用生物技术开发新型基因工程疫苗以克服现有疫苗的缺点。核酸疫苗作为疫苗家族的新成员有许多优点，笔者仅就乙型脑炎病毒核酸疫苗的研究现状作一综述。

关键词： 猪囊尾蚴病   重组抗原   基因工程疫苗  

摘要： 猪囊尾蚴病(Cysticercosis)是由猪带绦虫的幼虫囊尾蚴寄生于人或猪等而引起的人畜共患寄生虫病,是公认的世界经济病之一。严重威胁着人体健康,并给畜牧业造成重大经济损失,猪囊尾蚴病的免疫防治势在必行。然而在猪囊尾蚴病疫苗研究中,疫苗抗原的选择和来源一直困扰着兽医工作者。该文就近年来猪囊尾蚴病诊断重组抗原和基因工程疫苗的分子生物学研究进展进行了综述。

关键词： 基因工程疫苗   活载体疫苗   保护性抗原   基因工程方法   基因缺失疫苗   基因缺失苗   亚单位疫苗   克隆技术  

摘要： 基因工程疫苗是用基因工程方法或分子克隆技术。分离出病原的保护性抗原基因，将其转入原核或真核系统使表达出该病原的保护性抗原，制成疫苗，或者将病原的毒力相关基因删除掉，使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗。包括多肽或亚单位疫苗、颗粒载体疫苗、病毒活载体疫苗、细菌活载体疫苗、基因重配疫苗以及基因缺失疫苗如乙肝疫苗等。

关键词： 基因工程疫苗   标记疫苗   鉴别诊断   血清学检验技术   核酸检验技术  

摘要： 随着分子生物学等相关学科的迅速发展,已开发出一系列更加安全有效的基因工程疫苗,这些疫苗具有将疫苗免疫动物与天然毒株感染动物区分开的潜力,由此产生了对研发高效标记疫苗与鉴别诊断检验技术的需求,文章对标记疫苗与相应的鉴别诊断检验技术的研发现状进行了分析与综述,以期为标记疫苗及相应鉴别诊断检验技术的研究与推广应用提供参考。

关键词： 禽流感   基因工程疫苗   抗原表位   H5N1  

摘要： 以亚洲地区H5N1亚型禽流感病毒(Avian Influenze Virus)流行株为研究对象,利用计算机软件,对同源性较高的HA1(Hemagglutnin,HA,血凝素)和NP(Nucleocapsid protein,核衣壳蛋白)进行全基因序列分析,优选出HA1蛋白的主要T细胞表位和B细胞表位,以及NP蛋白的主要CTL(Cytotoxicity T lymphocyte,细胞毒性T淋巴细胞)表位。依据这些优选表位,设计了禽流感病毒H5N1亚型基因工程疫苗。构建了基因工程疫苗表达载体pRSET-AIV,外源基因能够在大肠杆菌表达系统中得到良好表达。表达产物免疫小鼠后,血清中IgA和IgG抗体水平明显上升,在体外培养脾细胞可产生IL-2、IL-4和IFN-γ细胞因子。验证了该H5N1亚型基因工程疫苗的抗原性,证实该基因工程疫苗在免疫小鼠体内激发体液免疫的同时调动了细胞免疫。

关键词： 甘蔗   抗逆性   基因工程   转基因   研究进展  

摘要： 病虫害、干旱、低温是甘蔗生产中主要的生物和非生物胁迫因素,给甘蔗生产造成巨大损失。提高甘蔗抗逆性是甘蔗育种的重要目标。基因工程技术在作物遗传改良中应用广泛,为甘蔗抗逆育种提供了有效途径。本文概述了转基因技术在甘蔗抗病虫害、抗旱、抗寒方面的研究进展,并提出了该领域尚存在的一些问题及其应用前景展望。

关键词： β-淀粉样肽(Aβ)   HBcAg   融合蛋白   病毒样颗粒   基因工程疫苗  

摘要： 目的：原核表达并纯化含β-淀粉样肽（β-amyloid peptide，Aβ）氨基段15肽（Aβ1-15）和删除c／el表位的截断型HBcAg的融合蛋白，观察其形成的病毒样颗粒，检测其免疫原性，为阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）基因工程疫苗的研究提供基础。方法：将合成的Aβ1-15基因连接于HBcAg的1-71的3’端，再将HBcAg的88～144位氨基酸的基因片断连接于Aβ1-15；的基因的3’端，构建重组质粒pUC／c—Aβ1-15将重组基因亚克隆于原核表达载体pET-28a（＋）中，构建表达质粒pET／c．Aβ1-15异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（isopropyl β—D-1-thiogalactopyranoside，IPTG）诱导、SDS—PAGE和考马斯亮蓝染色检测重组基因的表达。表达的融合蛋白（命名为CAl5C）纯化后，透射电镜观察病毒样颗粒的形成。以病毒颗粒抗原CA15C腹腔注射免疫昆明小鼠，间接ELISA法检测小鼠血清中抗-Aβ抗体的滴度。结果：经酶切鉴定、DNA序列测定证实，目的基因重组于表达质粒之中，与理论设计相符。诱导表达后，在细菌裂解液的上清和沉淀中均可见表达蛋白CA15C，以沉淀中为多，约占细菌沉淀总蛋白的40％。电镜下可见纯化后的CA15C形成直径约30nm的病毒样颗粒。昆明小鼠经CA15C免疫5次后，其血清中抗-AB抗体的滴度可达1：10000，且检测不到抗-HBc抗体。结论：原核表达制备的含Aβ1。和HBcAg的融合蛋白CA15C，可形成病毒样颗粒，有较强的免疫原性。