关键词： 猪圆环病毒   分子生物学诊断   基因工程疫苗  

摘要： 文章论述了猪圆环病毒分子生物学诊断方法,包括常规PCR方法、套式PCR方法、多重PCR方法、PCRRFLP方法、荧光定量PCR方法、环介导等温扩增技术等,并就其基因工程疫苗方面的研究进行了着重阐述。

关键词： 棘球蚴病   EG95   抗体检测   Echinococcus   丙类传染病   棘球绦虫   棘球属   二类动物疫病   畜产品安全   人兽共患病  

摘要： 棘球蚴病（Echinococcosis）又称包虫病（Hyda-tidosis）,是由带科（Taeniidae）棘球属（Echinococcus）的棘球绦虫（Echinococcus granulosus）的中绦期幼虫寄生于动物和人的肝、肺及其他器官内所引起的一种人兽共患病,农业部将其列为二类动物疫病,卫生部将其列入丙类传染病[1]。我省是全国包虫病重点省份之一,主要分布于甘孜州、阿坝州的31个疫区县,严重危害人民身体健康和生命安全,影响养殖业发展和畜产品安全,对社会经济发展造成严重威胁[2]。

关键词： 猪传染性胃肠炎   基因组结构   基因工程疫苗   研究进展   综述  

摘要： 猪传染性胃肠炎是危害全世界养猪业的重要疫病之一。预防和控制该病的主要措施之一就是疫苗接种,目前分子生物学技术发展迅速,对TGEV的研究取得了较大进展,本文主要对近年来该病毒疫苗的研究进展进行了深入概括阐述,为进一步做好该病防控工作贡献微薄之力。

关键词： 猪囊尾蚴   人畜共患寄生虫   核酸疫苗   多肽疫苗   新型疫苗   细胞苗   基因工程疫苗   疫苗研究   囊尾蚴病   疫苗生产  

摘要： 猪囊尾蚴病是由猪带绦虫幼虫寄生在人和猪等体内而引发的一种人畜共患寄生虫病,被世界公认的经济病之一,给养殖业带来极大经济损失,并且对人体健康存在严重的威胁,所以有效控制猪囊尾蚴病具有重要意义。虽然猪囊尾蚴病疫苗研究多种多样,但是目前选择特异性高且能有效快速防控猪囊尾蚴病的疫苗一直是个难题。本文就近年来猪囊尾蚴组织细胞苗、基因工程疫苗、核酸疫苗、多肽疫苗和其他新型疫苗的研究进展进行了综述。

关键词： 宁夏农林科学院   马铃薯产业   基因工程技术   育种技术   遗传转化方法   宁夏回族自治区   生物技术中心   遗传转化体系  

摘要： 在宁夏回族自治区农业育种专项、自然基金以及院先导资金等项目的资助下，宁夏农林科学院生物技术中心紧紧围绕宁夏马铃薯产业需求，利用基因工程技术开展马铃薯抗逆新种质材料的创制研究。针对传统的遗传转化方法周期长、转化效率低等关键问题，摸索出了一套不受基因型限制，转化周期缩短至30d以内，转化率达到40％以上的农杆菌介导的马铃薯高效遗传转化体系。目前，通过该转基因技术体系，已获得导入抗逆基因的马铃薯再生植株。

关键词： 疫苗接种   规模化猪场   单价疫苗   接种剂量   疫苗种类   基因工程疫苗   灭活疫苗   弱毒疫苗   细菌性疾病   合成多肽  

摘要： 规模化猪场通过环境控制、疫苗接种、药物添加来预防疾病的侵袭。疫苗在预防病毒性、细菌性疾病的流行中起到了重要的作用。疫苗种类的选择、运输及存储条件、接种剂量和部位、多疫苗接种间隔时间等都会影响疫苗的效果,轻则免疫失败、重则引起免疫应激甚至死亡。因此,本文探讨规模化猪场在疫苗免疫中的注意事项,供广大养殖户借鉴参考。1疫苗的选择目前,常用的疫苗分为弱毒疫苗和灭活疫苗、单价疫苗和多联疫苗、

关键词： 奶牛乳房炎   停乳链球菌   isp基因   基因工程疫苗   免疫原性  

摘要： 根据GenBank报道的停乳链球菌免疫分泌蛋白基因(immunogenic secreted protein,ISP)序列设计引物,PCR扩增得到1 550bp的isp片段,其基因序列与GenBank提交序列的同源性为98.13%.将isp基因与表达载体pET-25b(+)连接,成功构建重组质粒pET-25b(+)-isp.转化大肠杆菌BL21(DE3),成功得到阳性表达重组菌株BL21(pET-25b(+)-isp).经IPTG诱导后,SDS-PAGE与Western blot检测得到约55ku的目的蛋白.经优化确定,isp蛋白的最优表达条件:1mmol/L IPTG,37℃诱导18h,且此时表达的蛋白具有良好的抗原性.该研究制备了奶牛乳房炎停乳链球菌的基因工程疫苗,并对其免疫原性进行了探究,为奶牛乳房炎的免疫防治奠定了基础.

关键词： 狂犬病病毒   细菌噬菌体   抗体   病毒  

摘要： 目的 筛选针对狂犬病毒人源基因工程抗体.方法 采集狂犬疫苗免疫人群外周血并分离淋巴细胞,构建抗狂犬病毒Fab噬菌体抗体库,用纯化狂犬病毒CTN株富集筛选,ELISA初步鉴定阳性克隆,测序确定抗体轻重链型别,构建IgG全抗表达载体,转染293T细胞并纯化IgG抗体,采用竞争ELISA、Western Blot和IFA鉴定抗体功能.结果 筛选出1株抗狂犬病毒的人源Fab抗体并表达纯化IgG全抗体,IFA结果显示抗体特异针对狂犬病毒,竞争性ELISA,Western Blot结果显示新筛抗体针对磷蛋白.结论 首次通过Fab噬菌体抗体库技术获得针对狂犬病毒磷蛋白人源抗体,为磷蛋白功能机制研究和狂犬病的诊断提供了新的抗体.

关键词： 绿针假单胞菌   PCN   诱变   基因敲除  

摘要： 产量低是限制生物农药吩嗪-1-甲酰胺(Phenaizne-1-carboximade,PCN)推广应用的主要因素。本文综合使用诱变育种和基因工程改造来提高绿针假单胞菌的PCN产量。诱变育种使用亚硝基胍(NTG)和紫外线(UV)处理绿针假单胞菌HT66野生型菌株,以平板菌落表面的绿色PCN晶体量为指标建立高通量诱变筛选方法,通过10轮稳定可靠的诱变处理,获得的诱变高产株P3中PCN产量达到1 697mg/L,是野生菌株的3.99倍。在固体平板上培养时,P3菌株的菌落更大,PCN晶体更多且出现更早。在诱变育种的基础上进一步进行基因工程改造,敲除P3株中负调控PCN合成的rpeA基因,获得的P3ΔrpeA菌株PCN产量达到2 167mg/L,充分证明了2种育种方法结合使用的高效性。

关键词： 单链抗体(Sc   Fv)   基因工程抗体   单链抗体库   展示系统   表达   应用  

摘要： 单链抗体(single chain Fv,ScFv)是继单克隆抗体之后的基因工程抗体,为第3代抗体,其分子质量小,穿透力强,与抗原结合能力较好。ScFv可应用于靶向治疗载体、影像诊断和生物检测等方面,展示出了广阔的应用空间,被誉为一次革命性的进展。相信不久的将来,ScFv将凭借自身的优势,在医学、食品卫生和农业等领域发挥巨大作用。文章综述了Sc Fv的研究进展及其应用。