关键词： 猪瘟E2基因工程亚单位疫苗   育肥仔猪   免疫效果   断奶仔猪成活率   调查分析  

摘要： 为探究猪瘟E2基因工程亚单位疫苗相比于传统猪瘟C株弱毒疫苗(脾淋源)在免疫与生产上的优势,本文以汉中某一地方品种种猪场和代养场为调查对象,选择一批繁育母猪和育肥仔猪分别免疫猪瘟E2基因工程亚单位疫苗和猪瘟活苗,对比结果发现,母猪免疫猪瘟E2亚单位疫苗后哺乳仔猪断奶成活率平均提高了16.3%;且接种的两种猪瘟疫苗对育肥仔猪的免疫效果差异极显著(P<0.01),其中E2亚单位疫苗相比于猪瘟活疫苗能够明显提高育肥仔猪抗体阻断率和降低离散度,有助于育肥仔猪的健康生长,这为规模化猪场在选择猪瘟疫苗时提供重要参考依据。

关键词： 禽流感   流行病学   诊断   基因工程疫苗   防控措施  

摘要： 禽流感是由A型流感病毒引起的人畜共患传染病,在我国被列为Ⅰ类传染病,临床症状表现为咳嗽、喷嚏、呼吸困难、啰音、颜面部水肿、冠和肉髯发绀、腹泻和神经紊乱、角质鳞片出血、蛋鸡产蛋量和蛋的品质下降等,传染性强,死亡率高,给养禽业造成巨大经济损失。对该病的防控主要采取综合性措施,结合该病的流行病学特点,通过外防输入杜绝传染源,结合科学合理规划养殖场、加强饲养管理、建立健全疫情防控制度、疫苗免疫接种,来切断传播途径和增强家禽自身抵抗力,最大程度降低禽流感的发生率,保障养殖业的健康发展。

关键词： 病原体   基因工程技术   亚单位疫苗   病毒载体疫苗   核酸疫苗  

摘要： 疫苗接种被认为是控制病原体和预防人类以及动物疾病最有效的方法之一.近年来由于病毒性疾病来势汹汹,传统疫苗如灭活或减毒活疫苗的局限性及潜在问题日益突显,而基因工程技术的进步使得疫苗设计和研发得以改进,由此衍生的病毒类基因工程疫苗作为下一代疫苗越来越受到研究者的高度关注.通过病毒类基因工程疫苗的类型,重点介绍不同疫苗的开发原理、特点及用途,探讨其应用前景和发展趋势,旨在为新发病毒类疾病疫苗的研发提供参考.

关键词： 基因工程疫苗   动物疾病   防治   前景  

摘要： 随着生物科技的不断革新,动物疫病的防治手段也越来越多,但在兽医临床当中,疫苗仍然是重要的防护手段。传统疫苗的研制受到微生物体外培养以及安全性等多方面的限制,在使用中存在着较大的风险,而随着现代生物技术和手段的发展,利用基因工程技术研发的疫苗,具有更高的安全性和稳定性,同时还具备大批量生产的可能性,进一步降低了生产的成本,是未来动物疾病防治的主流发展趋势。本文对基因工程疫苗进行了简单的阐述,同时分析了基因工程疫苗所具有的优势和劣势,以及当前的应用现状,并就此分析了其在动物疾病防治当中的发展前景,以供相关人士参考。

关键词： 牛支原体   感染与免疫   灭活疫苗   弱毒活疫苗   基因工程疫苗  

摘要： 牛支原体(***)是牛的重要病原体,能够引起牛的乳腺炎、关节炎和肺炎等疾病。牛支原体已在全世界传播,对全球范围内的养牛业产生了重大不利影响。目前,由于牛支原体的耐药性有增强的趋势,同时缺乏有效的疫苗和治疗方法,这严重阻碍了牛支原体感染的控制。预防、控制甚至清除牛支原体最好的方法是使用有效的疫苗。虽然目前我国还没有获得新兽药证书的牛支原体疫苗,但相关的研究已取得了一定的进展。本文根据多年来牛支原体疫苗研究的相关资料,从牛支原体感染与免疫机制、灭活疫苗、弱毒活疫苗、基因工程疫苗四个方面进行综述,以期为今后牛支原体疫苗的研制提供思路及参考。

关键词： 基因工程抗体   呕吐毒素   玉米赤霉烯酮   免疫层析   双特异性抗体  

摘要： 玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN）和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol,DON）是粮食中常见的真菌毒素,对生物体具有生殖毒性和遗传毒性等,因而建立快速检测方法限制受真菌毒素污染的粮食流入市场十分必要。基因工程抗体作为三代抗体,能够克服传统抗体制备的限制,实现高效制备,有效定向改造进化,可广泛地应用于免疫快速检测中。大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115、哺乳动物细胞Expi293F作为成熟的重组蛋白表达体系,广泛应用于基因工程抗体的制备中。本文以3种表达系统制备了ZEN和DON的单特异性和双特异性抗体。基于单特异性抗体构建胶体金免疫层析方法并应用于粮食谷物检测,基于ZEN和DON双特异性抗体构建同步免疫检测试剂盒,实现ZEN和DON的同时定量检测。本文的主要研究内容如下:（1）大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115表达系统的评价。从NCBI库获取DON和ZEN抗体可变区的基因序列（NCBI登录号:AAC53026.1,AAC53027.1;Y151141,AY151140.1）,将重链可变区和轻链可变区用（GlySer）连接构建单链抗体（single chain antibody,sc Fv）,并分别于大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115中表达。结果表明,大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115表达的ZEN单链抗体（ZEN-sc Fv）均有活性,而DON的单链抗体（DON-sc Fv）对抗原均无识别活性。基于大肠杆菌BL21表达产物建立的酶联免疫吸附检测方法（Enzyme-Linked immunosorbent assays,ELISA）标准抑制曲线方程为Y=-0.009752X+1.275（R=0.9735）,IC为79.47 ng/m L;基于毕赤酵母GS115的表达产物的ELISA标准抑制曲线方程为Y=-0.01045X+1.218,R=0.9585,IC为68.71 ng/m L。（2）基于Expi293F哺乳动物细胞表达的ZEN和DON sc Fv、全长抗体（Immunoglobulin G,Ig G）以及双特异性单链抗体的评价研究。基于载体p CMV和p TT5,Expi293F细胞瞬时表达获得了ZEN和DON的sc Fv、Ig G、双特异性单链抗体,且基于p CMV载体表达产量更高。基于ZEN-sc Fv和ZEN-Ig G构建ELISA方法检测灵敏度分别为6.46 ng/m L和6.27 ng/m L;基于DON-Ig G和DON-sc Fv构建的ELISA方法灵敏度分别为140.35 ng/m L和69.01 ng/m L。双特异性单链抗体Bis-sc Fv对ZEN和DON具有结合活性,基于其构建的ELISA方法对ZEN和DON灵敏度分别为20.64 ng/m L和132.29 ng/m L,且具有较强的特异性。（3）基于基因工程抗体构建免疫检测方法。基于ZEN-Ig G,构建了检测谷物中ZEN的胶体金免疫层析方法,其视觉检测限为60 ng/m L,经HPLC方法学验证,该方法就有良好的准确性;基于双特性单链抗体建立双联酶联免疫检测方法,其ZEN和DON的定量范围分别为1 ng/m L～100 ng/m L和10 ng/m L～500 ng/m L,线性方程分别为Y=-0.4028Lg X+0.9614(R=0.9467,IC为13.98 ng/m L)和Y=-0.5275Lg X+1.585(R=0.9681,IC为113.99 ng/m L),该方法对玉米粉中的ZEN和DON的加标回收率为86.02%～108.14%,相对偏差小于15%。综上,基于大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115和哺乳动物细胞Expi293F三种宿主生物成功表达了ZEN和DON的单特异性抗体以及双特异性抗体,并基于哺乳动物细胞Expi293F表达抗体构建快检方法并实现应用,为高效的抗体制备和应用研究奠定了基础。

关键词： 基因工程疫苗   动物疫病   防控  

摘要： 基因工程作为一种先进的疫苗研发技术，在动物疫病防治中具有重要意义。本文综述了基因工程疫苗在动物疫病防治中的应用现状，包括亚单位疫苗、活载体疫苗、核酸疫苗等类型，并针对现有问题提出了相应的对策，为我国动物疫病防治提供科学依据。

关键词： 小反刍兽疫   小反刍兽疫病毒   聚合酶链反应   基因工程疫苗  

摘要： 小反刍兽疫是一种由小反刍兽疫病毒引起的急性传染疾病,病死率高,可超过90%,对全球动物卫生和公共卫生安全造成威胁。世界动物卫生组织将小反刍兽疫规定为必须报告的动物疫病,我国将其列为一类传染病。文章介绍小反刍兽疫病原学、流行病学特征以及临床症状,总结近年来临床常用的诊断及防治方法,以期为小反刍兽疫的临床诊断及防治提供参考。