关键词： 基因工程疫苗   动物疾病   防治   前景  

摘要： 随着生物科技的不断革新,动物疫病的防治手段也越来越多,但在兽医临床当中,疫苗仍然是重要的防护手段。传统疫苗的研制受到微生物体外培养以及安全性等多方面的限制,在使用中存在着较大的风险,而随着现代生物技术和手段的发展,利用基因工程技术研发的疫苗,具有更高的安全性和稳定性,同时还具备大批量生产的可能性,进一步降低了生产的成本,是未来动物疾病防治的主流发展趋势。本文对基因工程疫苗进行了简单的阐述,同时分析了基因工程疫苗所具有的优势和劣势,以及当前的应用现状,并就此分析了其在动物疾病防治当中的发展前景,以供相关人士参考。

关键词： 牛支原体   感染与免疫   灭活疫苗   弱毒活疫苗   基因工程疫苗  

摘要： 牛支原体(***)是牛的重要病原体,能够引起牛的乳腺炎、关节炎和肺炎等疾病。牛支原体已在全世界传播,对全球范围内的养牛业产生了重大不利影响。目前,由于牛支原体的耐药性有增强的趋势,同时缺乏有效的疫苗和治疗方法,这严重阻碍了牛支原体感染的控制。预防、控制甚至清除牛支原体最好的方法是使用有效的疫苗。虽然目前我国还没有获得新兽药证书的牛支原体疫苗,但相关的研究已取得了一定的进展。本文根据多年来牛支原体疫苗研究的相关资料,从牛支原体感染与免疫机制、灭活疫苗、弱毒活疫苗、基因工程疫苗四个方面进行综述,以期为今后牛支原体疫苗的研制提供思路及参考。

关键词： 基因工程抗体   呕吐毒素   玉米赤霉烯酮   免疫层析   双特异性抗体  

摘要： 玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN）和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol,DON）是粮食中常见的真菌毒素,对生物体具有生殖毒性和遗传毒性等,因而建立快速检测方法限制受真菌毒素污染的粮食流入市场十分必要。基因工程抗体作为三代抗体,能够克服传统抗体制备的限制,实现高效制备,有效定向改造进化,可广泛地应用于免疫快速检测中。大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115、哺乳动物细胞Expi293F作为成熟的重组蛋白表达体系,广泛应用于基因工程抗体的制备中。本文以3种表达系统制备了ZEN和DON的单特异性和双特异性抗体。基于单特异性抗体构建胶体金免疫层析方法并应用于粮食谷物检测,基于ZEN和DON双特异性抗体构建同步免疫检测试剂盒,实现ZEN和DON的同时定量检测。本文的主要研究内容如下:（1）大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115表达系统的评价。从NCBI库获取DON和ZEN抗体可变区的基因序列（NCBI登录号:AAC53026.1,AAC53027.1;Y151141,AY151140.1）,将重链可变区和轻链可变区用（GlySer）连接构建单链抗体（single chain antibody,sc Fv）,并分别于大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115中表达。结果表明,大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115表达的ZEN单链抗体（ZEN-sc Fv）均有活性,而DON的单链抗体（DON-sc Fv）对抗原均无识别活性。基于大肠杆菌BL21表达产物建立的酶联免疫吸附检测方法（Enzyme-Linked immunosorbent assays,ELISA）标准抑制曲线方程为Y=-0.009752X+1.275（R=0.9735）,IC为79.47 ng/m L;基于毕赤酵母GS115的表达产物的ELISA标准抑制曲线方程为Y=-0.01045X+1.218,R=0.9585,IC为68.71 ng/m L。（2）基于Expi293F哺乳动物细胞表达的ZEN和DON sc Fv、全长抗体（Immunoglobulin G,Ig G）以及双特异性单链抗体的评价研究。基于载体p CMV和p TT5,Expi293F细胞瞬时表达获得了ZEN和DON的sc Fv、Ig G、双特异性单链抗体,且基于p CMV载体表达产量更高。基于ZEN-sc Fv和ZEN-Ig G构建ELISA方法检测灵敏度分别为6.46 ng/m L和6.27 ng/m L;基于DON-Ig G和DON-sc Fv构建的ELISA方法灵敏度分别为140.35 ng/m L和69.01 ng/m L。双特异性单链抗体Bis-sc Fv对ZEN和DON具有结合活性,基于其构建的ELISA方法对ZEN和DON灵敏度分别为20.64 ng/m L和132.29 ng/m L,且具有较强的特异性。（3）基于基因工程抗体构建免疫检测方法。基于ZEN-Ig G,构建了检测谷物中ZEN的胶体金免疫层析方法,其视觉检测限为60 ng/m L,经HPLC方法学验证,该方法就有良好的准确性;基于双特性单链抗体建立双联酶联免疫检测方法,其ZEN和DON的定量范围分别为1 ng/m L～100 ng/m L和10 ng/m L～500 ng/m L,线性方程分别为Y=-0.4028Lg X+0.9614(R=0.9467,IC为13.98 ng/m L)和Y=-0.5275Lg X+1.585(R=0.9681,IC为113.99 ng/m L),该方法对玉米粉中的ZEN和DON的加标回收率为86.02%～108.14%,相对偏差小于15%。综上,基于大肠杆菌BL21、毕赤酵母GS115和哺乳动物细胞Expi293F三种宿主生物成功表达了ZEN和DON的单特异性抗体以及双特异性抗体,并基于哺乳动物细胞Expi293F表达抗体构建快检方法并实现应用,为高效的抗体制备和应用研究奠定了基础。

关键词： 小反刍兽疫   小反刍兽疫病毒   聚合酶链反应   基因工程疫苗  

摘要： 小反刍兽疫是一种由小反刍兽疫病毒引起的急性传染疾病,病死率高,可超过90%,对全球动物卫生和公共卫生安全造成威胁。世界动物卫生组织将小反刍兽疫规定为必须报告的动物疫病,我国将其列为一类传染病。文章介绍小反刍兽疫病原学、流行病学特征以及临床症状,总结近年来临床常用的诊断及防治方法,以期为小反刍兽疫的临床诊断及防治提供参考。

关键词： 大豆育种   育种方法   辐射诱变育种   基因工程育种   多倍体育种   育成品种   分子育种   选择育种  

摘要： 1大豆育种方法如今大豆育种常用的方法较多,包括传统的选择育种和随着生物技术的高速发展逐渐形成的分子育种。传统育种方法有系统育种、杂交育种、辐射诱变育种(也称物理诱变育种)和化学诱变育种。从遗传学的角度来说,目前,大豆常用的育种方法有单倍体和多倍体育种,有性杂交育种、生物基因工程育种和各种诱变育种。传统的育种方法帮助农业科技人员选育出许多优良的大豆品种。近年来,逐渐兴起了诱变育种和分子育种,成为改良大豆种质资源和加快大豆遗传育种效率的重要方式。

关键词： 动物基因工程技术   动物遗传育种   应用现状   发展前景  

摘要： 动物基因工程技术利用先进的生物技术手段对动物基因进行编辑和改造,以达到改良动物品种、提高生产性能、增强适应力等目的。随着科学技术的不断进步,动物基因工程技术在动物遗传育种领域的应用现状和发展前景备受关注。因此,文章对动物基因工程技术在动物遗传育种领域的应用现状与发展前景进行研究,以期能为未来的动物遗传育种研究和实践提供一些指导。

关键词： 基因工程药物   生物制药   血液制品   生产车间   基因工程疫苗   现代生物技术   诊断试剂   附属设施  

摘要： 项目内容和规模:项目占地50亩,主要建设生产车间、仓库、行政办公室、研发中心及附属设施等。运用现代生物技术生产用于人类疾病预防、诊断、治疗的医药产品,包括基因工程药物、基因工程疫苗、新型疫苗、诊断试剂(盒)、微生态制剂、血液制品及代用品等。项目建成后,年产值12亿元,税收5000万元。

关键词： 单链抗体   基因工程抗体   噬菌体展示系统   核糖体展示系统  

摘要： 单链抗体(single chain antibody fragment,scFv)是由抗体重链可变区(variable region of heavy chain,VH)和轻链可变区(variable region of light chain,VL)通过柔性短肽连接组成的小分子,是具有完整抗原结合活性的最小功能片段,包含抗体识别及抗原结合部位。相比于其他抗体,scFv具有分子量小、穿透性强、免疫原性弱、易构建表达等优点。目前,scFv最常用的展示系统主要有噬菌体展示系统、核糖体展示系统、mRNA展示系统、酵母细胞表面展示系统和哺乳动物细胞展示系统等。近年来,随着scFv在医学、生物学、食品安全学等领域的发展,使得其在生物合成和应用研究方面备受关注。本文对近年来scFv展示系统的研究进展作一综述,以期为scFv的筛选及应用提供理论基础。

关键词： 抗病能力   基因工程疫苗   疫病检测   现代生物技术   动物基因   DNA芯片   蛋白质芯片   基因工程技术  

摘要： 现代生物技术在动物疫病防制中的应用已经取得了显著的进展。通过基因工程技术,研发和应用基因工程疫苗,可以提高动物的抗病能力,降低疫病的发生和传播风险。基因编辑技术的应用可以对动物基因进行精确改良,增强其对特定疫病的抗性。此外,DNA芯片和蛋白质芯片的原理和应用,以及生物芯片在疫病检测和监测中的案例和优势也对动物疫病防制起到了重要作用。这些现代生物技术的应用为动物疫病防制提供了新的途径和策略。

关键词： 产业化技术   基因工程育种   园艺作物   种子种苗   脱毒种苗   浙江大学   药用植物   产业化生产  

摘要： 种子种苗是产业发展的基础.浙江大学毛碧增研究员潜心专研植物品质改良及产业化技术,主要以药用植物、经济作物和园艺作物等为材料,开展种质资源的评价、病毒对品质的影响、脱毒健康种苗的产业化生产、基因工程育种等方面的研究.面向产业需要,她带领团队致力于健康脱毒种苗创制与种苗产业化生产.