关键词： 猪瘟病毒   E2基因   基因工程疫苗  

摘要： 猪瘟(Hog Cholera)是危害中国养猪业的重要疫病之一,由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起.由于CSFV病毒滴度低,不引起细胞病变,给CSFV的研究带来很大的困难.随着近年来分子生物学技术的发展,使人们已有可能对CSFV进行深入研究与防制,特别对于中国这样一个养猪业的大国来说,更具有十分重要的意义.该论文分为2个部分,第一部分工作主要是对CSFV结构基因E2作为基因工程疫苗的初步研究,以探讨新型猪瘟疫苗的可能性;第二部分工作侧重于CSFV C 株弱素在牛睾丸细胞中增殖的某些生物学特征并对提高病毒滴度的可能途径进行了一些探索.作者在实验中首次克隆了CSFV石门系强毒F114株结构基因E2,测定了它的核苷酸序列,并在昆虫细胞Sf9中表达出GST-E2、GFP-GST-E2融合蛋白;另外,作者还构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-E2,在COS-7细胞中得到了表达,进而作者用这一表达质粒直接在小鼠肌内注射接种,可监测出其血清呈抗E2抗体阳性反应,效价明显高于阳性对照的抗E2单抗.在探索CSFV C株的增殖特性时,作者的实验结果表明原代牛睾丸细胞中的成纤维型细胞更有利于C株弱毒疫苗的生产;一定浓度的PEG有助于提高C株的滴度,而DMSO对维持病毒的滴度也有一定的作用;另外,还发现C株可能对巨噬细胞的增殖有某种促进作用.以上这些研究工作虽然还是很初步的,但所得的结果对猪瘟新型疫苗的研制以及当前使用的CSFV弱毒疫苗的生产均提供了一些颇有启发性的实验证据.

关键词： 病毒载体   疫苗传递系统  

摘要： 病毒基因工程疫苗是以活病毒为载体将一段外源基因导入机体细胞内,并使外源基因维持较高水平的表达。通过使用复制型或复制缺陷型载体能使表达的抗原诱生机体产生相应的体液抗体,并能引起机体产生细胞介导的免疫反应及粘膜免疫反应。本文主要介绍有可能用于基因工程疫苗的DNA及RNA病毒载体构建及其应用。

关键词： 新型疫苗   亚单位疫苗   分子生物学技术   兽医研究所   基因工程疫苗   畜禽   基因克隆   基因缺失   传染性支气管炎病毒   亚单位苗  

摘要： 随着生物工程技术和生物化学乃至分子生物学的发展，我国畜禽疫苗无论在疫苗的种类或是疫苗的类型上均有重要的进展。新疫苗和苗型不断研制成功，特别是近几年来分子生物学研究在我国畜禽传染病领域里的开展日趋活跃和深入，在追踪世界先进技术方面进行了许多成功的尝试，...

关键词： 日本血吸虫   疫苗候选抗原   基因工程  

摘要： 本文报道应用PCR技术或RT－PCR技术从日本血吸虫成虫cDNA文库或成虫mRNA中扩增到Sj28GST、C－Sjparamyosin、H-Sj23、Sj14、Sj22．6和***6个编码日本血吸虫中国大陆株抗原的基因，并把它们克隆入适合载体中，在大肠杆菌系统和蚕核型多角体病毒（BmNPV）系统中进行表达．免疫学检测证明这6种基因重组抗原都具有较好的抗原性。我们进一步应用4种比较成熟的基因重组抗原Sj26GST、Sj28GST、C－***和H－Sj23进行3批绵羊试验和1批黄、水牛田间试验，评估这几种重组抗原在绵羊和黄、水牛中的免疫保护效果，rSj26GST和rSj28GST分别获得62．1％和50.4％－68.5％的显著保护；n－paramyosin获得42.9％－55．3％、r－C－paramyosin获得44．2％－47．1％的显著保护，r－H－Sj23为51．2％－66．1％的显著保护．各组免疫后的粪便虫卵数和组织虫卵数也有不同程度的减少．用r－C－Sjparamyosin、r－Sj28GST和r－H－Sj23免疫典、水牛在血吸虫重疫区田间试验的结果表明，减虫率水牛高于黄牛，显示上述试验的3种日本血吸虫重组分子抗原有希望成为家畜日本血吸虫病的候选疫苗抗原．

关键词： 抗体基因   植物抗性   转基因植物   基因工程  

摘要： 抗体基因工程与植物生物技术相结合 ,产生了植物抗体 .研究表明 ,工程抗体中不论是全抗体或小分子抗体 ,在植物中表达后都具有与抗原结合的活性 ,即具功能性 ,从而使植物抗体的研究备受人们的关注 .目前主要在下述 3个方面开展研究 :( 1 )医用治疗性抗体 .人们期望利用农业大田规模的方式生产抗体 ,以降低成本 .另外 ,利用植物可多次杂交的特点 ,装配双 (或多 )功能的新的大分子抗体 ,创造新的抗体药物 ;( 2 )植物生理 .通过表达植物激素及微量活性物质的工程抗体 ,封闭原有活性成分 ,研究植物的生长和发育 ;( 3)植物抗病 .将由植物病毒制备出的工程抗体基因转入植物 ,以抵御该病毒的入侵 ,达到防病、治病的目的 .

关键词： PCR技术   扩增产物   基因组   基因文库   生物素   引物   基因工程疫苗   反转录   血清Ⅰ型   传染性法氏囊病病毒  

摘要： 聚合酶链式反应技术（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是１９８５年美国Ｃｅｔｕｓ公司Ｍｕｌｉｓ等人开发的一项专利，特点是所需样品极少，获得结果相当准确，因而用途越来越广泛。一ＰＣＲ基本原理类似于天然ＤＮＡ的复制机制根据已知的待...

关键词： 二硫键抗体   基因工程   分子设计  

摘要： 二硫键抗体（ｄｓＦｖ）的概念最早出现于１９９０年，它是将抗体重链可变区（ＶＨ）和轻链可变区（ＶＬ）的各一个氨基酸残基突变为半胱氨酸，通过链间二硫键连接抗体可变区（Ｆｖ）的片段抗体．通用的突变位点是重链的４４位和轻链的１００位或重链的１０５位和轻链的４３位．ｄｓＦｖ最显著的优点是生化性质稳定，能够耐受环境条件的剧烈作用，在血液中的半衰期长达１４ｄ以上，符合临床给药要求．动物实验显示，ｄｓＦｖ毒素在不对动物造成毒副作用的情况下，可完全抑制肿瘤生长．

关键词： Ⅳ型胶原酶   肿瘤转换   基因工程   抗体   治疗  

摘要： 肿瘤组织内Ⅳ型胶原酶表达和活性升高与肿瘤转移密切相关 .抑制Ⅳ型胶原酶活性的物质能够有效地抑制或降低肿瘤的转移 .因此Ⅳ型胶原酶已成为恶性肿瘤辅助诊断和控制癌转移的标志分子之一 .利用噬菌体抗体展示技术 ,在人抗体库研究的基础上 ,成功地研制出一种Ⅳ型胶原酶特异人源单链抗体hCo4.该抗体主要是由抗体轻链可变区和重链可变区组成 ,分子量约为 2 7ku .ELISA和免疫印迹均证明hCo4能够与Ⅳ型胶原酶特异结合 ,是目前所报道的Ⅳ型胶原酶特异抗体中分子量最小的人基因工程抗体 .该抗体的亲和力与从分泌抗Ⅳ型胶原酶单抗的杂交瘤细胞制备的鼠源单链抗体亲和力相同 .它有可能成为一种研究Ⅳ型胶原酶与肿瘤转移相互关系的工具以及用于肿瘤免疫诊断和治疗 .

关键词： 乙肝基因疫苗   抗体   免疫效果  

摘要： 应用ＳＰＲＩＡ测定抗－ＨＢｓ的方法对乙肝基因疫苗免后３６月的农村小学生进行追踪观察。结果是：美国ｍｅｒｃｋ酵母苗抗－ＨＢｓ阳性率为８０．４９％，美国Ａｍｇｅｎ苗为８３．３３％，国产１－３７血源苗为７７．７８％，国产９２０３－１血源苗为９３．１０％。ＧＭＴ值分别是７４．６２；１４５．７５；１３４．６９；２０１．２９ｍＩｕ／ｍｌ，与免后２４月相比，抗体阳性率略有下降，与免后１２月相比ＧＭＴ值分别下降３８．３８％，４９．９６％，３７．４１％，５６．１９％。证明乙肝基因疫苗三年免疫持久性良好。

关键词： 信息集   注射器   海洋药物   医疗器械   零售企业   医疗单位   基因工程疫苗   药品价格   维吾尔医药   超声波