摘要： 我院2年来使用兰州生物制品研究所研制的双卵巢细胞乙型肝炎基因工程疫苗免疫健康者142人,效果如下:1 材料和方法免疫对象以本院儿童在本院门诊检查血清乙型肝炎病毒标志(HBVM)阴性者.用乙型肝炎基因工程疫苗免疫142人(A组)对照组乙型肝炎血源疫苗123人(B组).两组年龄均为1个月-38岁(15岁者接种10μg/次)15岁者接种30μg次,接种程序为0、1、6月,接种第三针后30天(T3)左右.进行血清HBM检测,观察抗HBS及HBVM.

关键词： 人胎盘酸性铁蛋白   单克隆抗体   基因工程   融合蛋白   序列分析   三维空间结构  

摘要： 该研究从理论和实践上,综合运用生物化学、分子生物学和计算机工作站分析,对抗 人PAF McAbs的分析和改造进行了深入研究.首先,在理论上,对McAb的一级序列进行了比 较分析,发现抗人PAF McAb的特异性主要取决于D基因和VH-D、D-J基因的连接方式.这就从理论上证明了抗体VH的CDR3区在抗体的反应特异性方面的主导作用,证实了有限的抗体基因可以应答广泛的抗原的分子机制.对抗人PAF scFv 3D结构的计算机模建和分析,并以此模 拟McAb的VH和VL相互结合的3D结构,发现两株抗人PAF McAbs的亲和力的不同主要是由VH和VL上的在3D结构上位于"疏水口袋"中心的个别氨基酸的突变造成的,从而证实了B细胞通过点突变提高抗体亲和力的分子机制,同时揭示了"疏水口袋"疏水性的强弱与抗体亲和力的高低密切相关,至少在抗人PAF抗体如此.

关键词： 甲型肝炎病毒   噬菌体抗体   基因工程抗体   真核表达  

摘要： 抗体分子的研究及应用一直是免疫学乃至整个生物学研究的热点。在生物制品中，抗体类占了很大的份额，因此抗体工程的发展倍受人们的关注。抗体技术由最初的血清多克隆抗体发展到杂交瘤单克隆抗体技术，直到目前的基因工程抗体技术，尤其是噬菌体抗体库技术的出现，将抗体工程推到了一个新的发展阶段。甲型肝炎病毒(HAV)是危害人类健康的重要致病原之一，目前已有多种用于接触前预防的甲肝疫苗。但对于接触后预防或短期到HAV高流行区的旅游者的预防，则多采用免疫球蛋白作被动免疫。血源性免疫球蛋白虽然效价高，应用效果好，但可能被血源病原体污染，且浪费血源。因此基因工程人源抗体有望成为接触后预防的首选制剂。为此，我们用HAV的细胞培养抗原对已有的人源噬菌体抗体库进行筛选，获得了与HAV抗原有结合活性的噬菌体抗体，并改建成Fab及全分子抗体，并用不同的表达系统进行了表达。 一、人源抗HAV Fab基因的克隆及可溶性表达 用抗体捕获的HAV抗原对噬菌体抗体库进行三轮淘筛，筛选出与HAV抗原有特异性结合能力的抗体，并对其重、轻链基因进行了序列测定，分析表明重链Fd基因属IgG1亚类，轻链基因属κ亚类。在此基础上构建了可溶性Fab表达载体，并获得可溶性表达。

关键词： 生长抑素,基因工程疫苗,免疫,ELISA检测,抗体  

摘要： 本文首先建立了测定激生Ⅰ号苗中HBsAg和SS含量的ELISA定量分析 方法。应用本法对激生Ⅰ号苗中HBsAg和SS含量进行分析，可以反映激生Ⅰ 号苗在鸡胚上的增殖情况，是苗的一个必要的质量控制指标。试验数据表明， 苗中HBsAg与SS的表达量之比约为200-250:1，这与利用RIA进行的表达量 分析结果接近。 利用特定的渗透休克法提取基因工程表达的产物作为抗原，经一定的处理 进行包被，建立了检测激生Ⅰ号苗免疫动物血清中SS抗体的间接ELISA检测 技术。另外还建立了测定HBsAg抗体的间接ELISA技术，这两种方法经阻断 试验和重复性试验，表明方法的特异性良好、重复性良好。应用这两种方法对 激生Ⅰ号苗免疫动物血清进行检测，表明动物产生了一定量的SS抗体及 HBsAg抗体。 通过试验研究，确定了10～7PFU/头为激生Ⅰ号苗对肉猪的最适免疫剂量。在 免疫后2周与10周，10～7组的增重分别比对照组提高16.85％、10.1％，达到显 著水平（P＜0.05），到试验结束时，该组增重比对照组提高7.6％，即4.02千 克。剂量过大或过小增重效果均不好。另外，饲养管理水平及疾病因子对该疫 苗的免疫效果影响很大。 利用pET-32大肠杆菌融合表达系统，以硫氧还蛋白（Thioredoxin）为表 达载体，已研制成了可用于多次免疫的SS基因工程亚单位疫苗，视插入位点 不同分为2株基因工程体，其表达的SS融合蛋白分别为SS-N/X和SS-N/S。 将它们分别与弗氏不完全佐剂乳化制成疫苗，免疫BALB/C小鼠，中和动物 体内的SS，从而促进动物的生长。结果表明，激生N/X和N/S苗对雌性小鼠 的增重效果显著，分别比对照组增重30.54％、36.88％（P＜0.05），而且该苗对 二 倾l：论义：主长抑凭基因工程疫苗相关检测方法的研究 小鼠的增重效果有显著的性别差异，雌性小鼠的增重效果要好于雄性小鼠。 本文还利用特异的抗原包被技术，建立了测定激生N八和N书苗兔疫动物 血清中SS抗体的ELISA测定方法。试验表明，该法特异性强、重复性好。应 用该法对小鼠血清的 SS抗体检测表明，激生N八和 N乃茵免疫动物后，动物 产生了一定量的SS抗体，且SS抗体可以维持3－4个月。

关键词： 基因工程技术   双链抗体   表达   应用  

摘要： 双链抗体（Diabody）是将两种抗体的重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因交叉连接，形成“杂交”的单链抗体基因，表达后，两条单链抗体双链抗体自动互相折叠，形成双加或双特异性抗体片段。双链抗体在科学研究、免疫诊断和免疫治疗中都有广阔的应用前景。

关键词： 鱼类   干扰素   诱导   基因工程育种  

摘要： 自从1957年一种病毒抑制物即干扰素(Interferon,IFN)[1]被发现以来,此后40年,IFN一直是病毒学、细胞学、免疫学、分子生物学、临床医学、肿瘤学等相关学科的研究热点.IFN是细胞和机体受到病毒感染,或受核酸、细菌内毒素、促细胞分裂素等诱导时,由受体细胞分泌的一种具有广谱抗病毒活性的糖蛋白.

关键词： 基因工程双功能抗体   分子设计   表达系统  

摘要： 基因工程双功能抗体在临床肿瘤、病毒病等治疗和诊断方面具有广阔的应用前景，是抗体研究的热点之一。要获得有活性的双功能产物，关键在于分子设计及表达系统的选择。本文着重论述近年来基因工程双功能抗体在分子设计及表达研究方面的新进展。

关键词： chloroplasts   genetic engineering   transgene expression   genetic modification   plastids   plastid transformation   herbicide tolerance   TOBACCO PLASTID GENOME   GREEN FLUORESCENT PROTEIN   RIBOSOMAL-RNA GENES   PSBA MESSENGER-RNA   HIGHER-PLANTS   CHLAMYDOMONAS-REINHARDTII   SELECTABLE MARKER   SMALL-SUBUNIT   RIBULOSE-1,5-BISPHOSPHATE CARBOXYLASE   AGROBACTERIUM-TUMEFACIENS  

摘要： Transformation of the plastid genome has a number of inherent advantages for the engineering of gene expression in plants. These advantages include: 10-50 times higher transgene expression levels; the absence of gene silencing and position effect variation; the ability to express polycistronic messages from a single promoter; uniparental plastid gene inheritance in most crop plants that prevents pollen transmission of foreign DNA; integration via a homologous recombination process that facilitates targeted gene replacement and precise transgene control; and sequestration of foreign proteins in the organelle which prevents adverse interactions with the cytoplasmic environment. It is now 12 years since the first conclusive demonstration of stable introduction of cloned DNA into the Chlamydomonas chloroplast by the Boynton and Gillham laboratory, and 10 years since the laboratory of Pal Maliga successfully extended these approaches to tobacco. Since then, technical developments in plastid transformation and advances in our understanding of the rules of plastid gene expression have facilitated tremendous progress towards the goal of establishing the chloroplast as a feasible platform for genetic modification of plants. (C) 2000 Societe francaise de biochimie et biologie moleculaire / Editions scientifiques et medicales Elsevier SAS.

关键词： 传染性支气管炎   活疫苗   科研成果   科技成果   基因工程疫苗   油乳剂   鸡新城疫   新城疫   中国农业科学院  

关键词： 乙型肝炎病毒   噬菌体表面呈现技术   乙型肝炎表面抗体   Fab  

摘要： 本文中,作者们报道了运用噬菌体抗体库技术获得人源抗乙型肝炎病毒基因工程抗体Fab片段基因及其在大肠杆菌中的表达.作者们首先抽取抗-HBsAg阳性自然感染者的外周血,分离淋巴细胞,提取细胞总RNA,采用01igo-dT为引物逆转录合成cDNA,用一组人IgG Fab特异性引物,通过PCR方法扩增出一组轻链和重链Fd片段基因.然后将轻链和重链Fd片段先后克隆入pComb3噬菌粒载体,成功地构建了人源抗乙型肝炎病毒噬菌体抗体库,经鉴定,该库中轻链的克隆效率约为100,克隆数约为3.75*10<'5>;Fd克隆效率约为85,克隆数约为8*10<'5>.