关键词： 基因工程抗体   抗体   表达系统   大肠杆菌  

摘要： 为使临床上能广泛应用基因工程抗体，当务之急是研究方便、快捷、经济和批量制备活性抗体的技术，关键是选择高表达系统。本文对大肠杆菌、酵母、昆虫细胞及哺乳动物细胞表达系统进行了比较，并介绍其研究进展。

关键词： HBsAg   抗体   Fab   基因工程   乙型肝炎  

摘要： 将从抗体文库中筛选出的抗HBsAg Fab阳性克隆转化大肠肝杆菌 ,IPTG诱导表达 ,经Western blot鉴定 ,证实上清中含有可溶性抗HBsAg Fab片段 ,应用自制的羊抗人免疫球蛋白片段抗体 (anti Fab )与Gama bind交联制备的亲和层析柱纯化表达产物 ,所得纯化产物在SDS PAGE中形成单一条带 ,经Western blot证实具备良好抗原特异性 ,Dot blot证实具备良好抗原结合活性。

关键词： 鸡马立克氏病   基因工程疫苗   免疫机理  

摘要： 鸡马立克氏病的预防是养鸡业面临的重大问题之一,我国养鸡业每年因该病造成的损失近亿元。为此,针对马立克氏病的疫苗开发一直非常活跃,但新的强毒株的出现,使疫苗的预防效果不能尽如人意。目前,基因工程疫苗的开发、应用已全面展开,这意味着疫苗可望战胜强毒的侵袭,实现充分的预防效果,本文详细介绍了基因工程苗的研究进展。

关键词： 双功能抗体   基因工程   表达  

摘要： 基因工程双功能抗体是近年来抗体研究的一个热点 ,利用分子生物学技术 ,在体外构建基因工程抗体基因片段 ,与各种类型的表达载体相连 ,使重组抗体在原核细胞 ,哺乳类动物细胞 ,昆虫细胞表达系统中获得表达 ,其表达量 ,功能蛋白活性各具特点 ,显示出在临床肿瘤、病毒病的治疗和诊断方面的应用前景 ,本文就双功能抗体的构建方式及多种表达系统的研究进展进行综述。

关键词： 抗体   表面抗原   红细胞   凝集试验   乙型肝炎  

摘要： 目的　用抗乙肝表面抗原 (HBsAg)和抗红细胞 (RBC)双特异Diabody ,建立一种简便、快速、用全血检测血中HBsAg的方法。方法　用病人指血 ,耳血 ,抗凝全血 ,或残留未凝血细胞的非抗凝全血 2 0 μl与 5 0 μl双特异Diabody上清混合 ,分别在玻片和 96孔U型板观察血细胞凝集。结果　实验的简便性和敏感性以玻片法为优。用凝集法与ELISA法平行检测病人5 12例 ,以ELISA法结果为标准 ,凝集法假阳性率 0 % (n =3 47) ,假阴性率 2 4 % ( 4 / 165 )。自身红细胞凝集法检测HBsAg与ELISA方法符合率 97 6%。结论　本方法的优点是快速。

关键词： 嵌合抗体   基因工程抗体   骨髓瘤   VEGF165  

摘要： 目的　减少鼠源性单抗的免疫原性,获得抗人血管内皮生长因子165(vascularendothelialgrowthfactor165,VEGF165)的人/鼠嵌合抗体。方法　将抗VEGF165鼠单抗VmD11的轻链可变区基因VL和重链可变区基因VH分别克隆到带有人IgG1轻链恒定区基因Cκ,重链恒定区基因Cγ1的真核表达载体pAcycneoCκ和psv2gptCγ1上,构建了真核表达载体pAcycneoCκ/hu和psv2gptCγ1/hu,并应用脂质体转染的方法将其共同导入小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0中进行表达。结果转染后通过筛选培养获得了7个抗性细胞克隆,经亚克隆化培养得到4个稳定表达的阳性细胞株,ELISA检测到抗VEGF165人/鼠嵌合抗体表达,RTPCR也证实了该嵌合抗体在mRNA水平上的表达。培养上清液中的抗体表达量约为10μg/L,腹水中约为100μg/L,经竞争ELISA实验和Westernblot实验证实其具有与亲本鼠源单抗相同的VEGF165结合特性。结论　成功的构建了能与VEGF165结合的人/鼠嵌合抗体。

关键词： 基因工程   单链抗体   研究进展  

关键词： 乙型肝炎   抗HBs   单克隆抗体   Fab片段  

摘要： 目的：探索亲和纯化人源单克隆抗体片段的简便实用方法。方法：应用自制的抗人免疫球蛋白片段抗体（Ａｎｔｉ－Ｆａｂ）与链球菌蛋白Ｇ亲和胶（Ｇａｍ ｍ ａ Ｂｉｎｄ）交联制备亲和层析柱，用一步法从工程菌培养上清中纯化人源抗ＨＢｓ单克隆Ｆａｂ 片段。经依沙吖啶沉淀、离子交换、分子筛纯化人混合血清提取ＩｇＧ组分，木瓜酶处理后分离、纯化出Ｆａｂ，免疫绵羊制备高效价抗血清。用Ｇａｍ ｍ ａＢｉｎｄ 一步纯化出抗血清中的ＩｇＧ组分，再将该ＩｇＧ经交联剂与Ｇａｍ ｍ ａ Ｂｉｎｄ 交联后制成亲和胶。人源抗ＨＢｓ阳性菌培养上清与亲和胶共育后装柱，ＰＢＳ洗去非特异结合蛋白，再用５ ｍ ｏｌ／Ｌ氯化锂洗脱特异Ｆａｂ。结果：聚丙烯酰胺电泳纯化产物显示，纯化后的抗体片段在电泳中形成单一区带，达到电泳纯；用酶标抗Ｆａｂ 抗体免疫印迹结果证明，电泳显示的单一区带为Ｆａｂ 蛋白区带；抗原特异Ｄｏｔｂｌｏｔ检测表明，该法制备出的Ｆａｂ 保持了抗原结合活性。结论：本实验建立的一步亲和纯化法具操作简便、纯化快速和高效的特点，是人源性单克隆抗体Ｆａｂ

关键词： 科技型中小企业技术创新基金   项目指南   新型无机非金属材料   本年度   突出重点   基因工程疫苗   人工晶体   支持   高性能   技术创新项目  

摘要： 科技型中小企业技术创新基金(以下简称创新基金)是经国务院批准设立的一项专门用于培育、扶持和促进科技型中小企业技术创新的政府专项基金。创新基金支持科技型中小企业进行高新技术成果转化及开展技术创新活动。创新基金的投入旨在引导各级政府及各类金融机构加大对科技型中小企业的资金投入。创新基金不以自身营利为目的,而以国家经济结构调整和经济总量增长,创造更多的就业机会作为回报。为了充分体现政府基金的宏观政策导向,明确创新基金项目年度支持重点和技术领域发展方向,引导科技型中小企业申请创新基金支持。根据国务院办公厅转发的《科技部、财政部关于科技型中小企业技术创新基金的暂行规定》,科技部按照国家经济、科技总体发展需求和科技型中小企业的产业特点,编制了《2000年度科技型中小企业技术创新基金若干重点项目指南》。

关键词： 李彪   瑞金医院核医学科   基因工程抗体   研究型   上海   博士