关键词： 胞内抗体   肿瘤   基因治疗   基因工程抗体  

摘要： 自杂交瘤和单克隆抗体技术问世以来, 人们一直尝试将该技术用于肿瘤治疗. 抗体工程的进展使得人们能够对抗体分子进行改造, 研制具有高亲和力和特异结合力的基因工程抗体.

关键词： 基因工程疫苗   基因疫苗   生物技术  

摘要： 生物技术的发展，产生了基因工程疫苗和基因疫苗，它们以其巨大的优势，在疫苗领域有着广泛的应用，形成了多种类型的预防性疫苗和治疗性疫苗。

关键词： 单克隆抗体   金属硫蛋白   血栓显像剂   基因重组  

摘要： 目的为简化抗血小板P 选择素鼠/人嵌合单克隆抗体SZ 51/Hu的99mTc标记过程 ,并提高其99mTc标记效率 ,利用金属硫蛋白(MT)可与金属稳定结合的特点 ,通过基因工程的手段制备融合蛋白SZ 51/Hu MT。方法构建了SZ 51/Hu与MT的重组表达载体 ,并在小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0中进行了目的融合蛋白的表达。结果该融合蛋白在Sp2/0细胞中的表达量为3mg/L。对融合蛋白的各项性质分析表明 ,该融合蛋白的相对分子质量(Mr)为180000 ,且具有双向结合的特异性 :即一方面保持了SZ 51与活化血小板P 选择素的特异结合能力 ;另一方面又具有MT高效结合金属的特性。99mTc标记研究表明 ,该分子不需预处理即可被99m Tc直接标记 ,标记率可达79 %。结论获得具有双向结合特异性的融合蛋白SZ 51/Hu MT ,为研制新型血栓导向显像剂开辟了新途径。

关键词： 伪狂犬病毒   瞬时表达   基因工程疫苗   表达载体   猪  

摘要： 以含有伪狂犬病毒 (pseudorabiesvirus ,PRV)蛋白激酶 (proteinkinase ,PK)基因的重组质粒为基础 ,利用非互补粘性末端经过部分补平后成为粘性末端 ,再进行连接的方法克隆了与载体分子大小相当的报告基因表达盒 用限制性内切酶分析确证了伪狂犬病毒表达载体中报道基因表达盒的插入方向 ,并通过导入细胞后检测外源基因在体外的瞬时表达 。

关键词： 乙肝基因疫苗   免疫效果   免疫持久性  

摘要： 目的　国产乙肝基因疫苗应用时间不长 ,其免疫持久性尚不清楚。为评价国产乙肝CHO疫苗的免疫效果和免疫持久性而进行本研究。方法　应用两批国产乙肝CHO疫苗 (长春生物制品研究所生产 ) ,10 μg/剂。按 0、 1、 6程序免疫 15 0名HBVm阴性儿童 ,免疫后随访观察 5 6月。结果　全部接种儿童均无局部和全身异常反应。T7时抗—HBs阳转率均为 10 0 % ,T56时阳转率分别为 88 5 7%和 78 5 7%。

关键词： 猪囊虫病   基因工程疫苗   稳定性  

摘要： 目的　探讨猪囊虫病疫苗生产用工程菌菌种在传代过程中及不同保存条件下的稳定性。方法　对工程菌菌种按规程进行了 5 2代传代及不同条件下保存 ,检测菌种的质粒、表达量、免疫学活性等方面的变化。结果　经 5 2代传代 ,工程菌及其菌落形态结构及质粒DNA电泳与原始菌种一致 ,SDS -PAGE电泳显示分子量为 6 0kD ,其表达量约占菌体总蛋白的 19%～ 2 4% ,免疫学活性为 4 0× 10 3 ～ 1 6× 10 4 /mg ,与原代菌种基本一致。菌种在 4℃、 - 2 0℃、 - 30℃、 - 70℃下保存 ,菌种稳定性不一致 ,- 70℃最稳定 ,- 2 0℃最差。结论　猪囊虫病基因工程疫苗生产用工程菌菌种经 5 2次人工传代和- 70℃保存 ,其各种特性是稳定的。

关键词： 基因工程   甜菜   抗丛根病育种   应用  

摘要： 自从Canova在意大利首先发现甜菜丛根病[1],该病在世界各国相继发生.我国于70年代末在内蒙古、新疆等甜菜产区也发现该病害.由于丛根病的危害 ,造成了甜菜产量和含糖的严重下降,所以选育出抗病品种是解决丛根病问题的关键.目前可利用的抗性品种资源少,常规育种选育出的大部分品种是耐病型品种,随着病原小种及环境条件的变化,耐病型品种出现抗性退化现象,只有通过与含有双显性抗性基因的野生甜菜杂交 ,才能育成真正的免疫型品种[2].因为常规育种的有性杂交方法选育时间长,耗资大,还要克服远缘杂交不亲和性的困难,所以,近年来,随着分子生物学和生物工程技术的迅速发展,开辟了甜菜育种的新途径,国内外科学家利用细胞融合、外源DNA导入等基因工程手段把抗病基因导入多种作物品种中,获得转基因抗性植株.本文就国内外利用基因工程方法在抗甜菜丛根病育种方面的研究工作,进行简单综述.

关键词： 丙型肝炎病毒   单链可变区抗体   NS3蛋白  

摘要： 目的在大肠杆菌ＸＬ_１－Ｂｌｕｅ中表达可溶性的抗ＨＣＶ非结构蛋白ＮＳ_３的人源单链可变区抗体（ｓｉｎｇｌｅ－ｃｈａｉｎ ｖａｒｉａｂｌｅ　ｆｒａｇｍｅｎｔ ａｎｔｉｂｏｄｙ，ＳＣＦＶ）。方法以重组的 ＨＣＶ ＮＳ_３为抗原，利用噬菌体抗体库技术筛选含有抗－ＨＣＶ ＮＳ_３ ＳＣＦｖ基因的噬菌体克隆。从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒，经ＳｆｉＩ／ＮｏｔＩ酶切鉴定后，亚克隆到ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ载体；转化大肠杆菌ＸＬ_１－Ｂｌｕｅ，提取质粒进行ＤＮＡ序列测定；异丙基硫代－β－Ｄ－半乳糖苷（ｉｓｏｐｒｏｐｙｌｔｈｉｏ－β－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓｉｄｅ，ＩＰＴＧ）诱导表达 ＨＣＶ ＮＳ_３可溶性单链可变区抗体。 ＥＬＩＳＡ和斑点吸印杂交检测其与不同来源的抗原的结合活性。结果筛选到的ＨＣＶ ＮＳ_３的单链抗体基因，经限制性内切酶酶切和序列分析表明，该抗体基因由 ７５０ｂｐ组成， ＥＬＩＳＡ和斑点吸印杂交结果表明，在大肠杆菌 ＸＬＩ-Ｂｉｌｌ６中表达的 ＨＣＶ ＮＳ_３的单链抗体，可与不同来源的ＮＳ_３抗原结合。结论大肠杆菌ＸＬ_Ｉ－Ｂｌｕｅ表达的ＮＳ_３－ＳＣＦＶ具有结合不同来源的ＨＣＶＮＳ３的活性和特异性。

关键词： 犬   IFN-γ   基因克隆   病毒病   基因工程疫苗  

摘要： 根据已发表的犬γ干扰素 (Ca-IFN -r)cDNA序列设计引物 ,用植物血凝素 (PHA)有机锗 (Ge - 1 3 2 )刺激体外培养的犬脾细胞产生IFN ,提取IFNmRNA ,并以其为模板进行返转录聚合酶链反应 (RT -PCR) ,扩增出 4 80bp基因片段。经酶切鉴定后将其克隆到pUC1 9的SmaI,构建重组质粒 pUC·IFN。经酶切、PCR及序列分析鉴定 ,可证明克隆的基因为犬γ干扰素 ,与所发表的核苷酸序列同源率为 97.3 %

关键词： 谷子   基因枪   幼穗   转基因植株   基因工程育种  

摘要： 以 JQ- 70 0型国产基因枪轰击豫谷 2号谷子幼穗 ,在 1 50 mg/L卡那霉素选择培养基上筛选到 90 8块抗性愈伤组织 ,其中 ,绿芽块愈伤 5块 ,共分化出 1 6株绿苗。组织化学检测GUS表达 ,获得 3株阳性植株 ,Southern杂交证明 1株为阳性。以轰击总外植体计算的转基因植株频率为 0 .0 5%。