关键词： SAG12-ipt基因   木薯   转化   基因工程育种   抗衰老   培养基   转基因株  

摘要： 以农杆菌介导的转化方法将一个抗叶片早衰的基因成功地导入木薯基因组 .将成熟培养 1 5天后的胚状体的子叶切碎 ,与农杆菌LBA44 0 4共培养 3天 ,然后转入器官发生培养基 (MS基本培养基附加BAP 1mg/L、IBA 0 .5mg/L)附加 3 0mg/LG41 8进行筛选 .三个星期后出现抗性的愈伤、芽 .将这些抗性芽连同外植体转入茎轴生长培养基促进苗的生长 ,最后转入生根培养基长成植株 .所得抗性株经PCR、Southern分析证实部分植株为转基因株 .

关键词： 水稻   基因工程   仪器设备   育种  

摘要： 介绍了水稻基因工程育种应具备的主要通用仪器设备及专用的。

关键词： 口蹄疫   基因工程疫苗   免疫效力   安全性   抗体消长  

摘要： 对猪“Ｏ”型口蹄疫基因工程疫苗进行免疫效力和安全性的观察，同时检测了免疫猪的抗体消长。结果表明，该基因工程疫苗对猪体是安全、有效的。免疫猪抗体乳鼠中和指数在免疫后４个月仍可达２．０，血凝价仍达２７．５。

关键词： 农杆菌介导   BNYVVCP   甜菜   抗病育种   基因工程  

摘要： 采用含有甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白 (BNYVVCP)基因的农杆菌 ,分别以不同甜菜品系的叶柄、下胚轴及子叶为外植体材料进行基因转化研究。含有BNYVVCP基因和卡那霉素抗性筛选基因 (Kanr)的农杆菌与甜菜组织不同外植体共培养后 ,经过诱导分化培养 ,在含有卡那霉素 (kanamycin)的培养基上 ,从叶柄及下胚轴分别直接诱导出抗卡那霉素再生芽 ,而从子叶上只诱导出紧密型绿色愈伤组织 ,未分化出不定芽。从叶柄及下胚轴诱导再生芽的诱导培养基分别为 :MS +BA0 5+TIBA0 2 +3 %蔗糖 +Kan2 0 0 +Cb50 0、MS+BA0 1 5+NAA0 2 +3 %蔗糖 +Kan1 0 0 +Cb50 0。甜菜再生植株诱导频率与甜菜品系、外植体类型、苗龄、温度、TIBA、预处理等因素有关。再生植株生根培养基为 :MS +IBA2 0 +2 %蔗糖 +Kan50。

关键词： 疫苗免疫   免疫原性   精蛋白   肝素拮抗药   动物基因工程疫苗   弹状病毒   狂犬病病毒  

关键词： 活载体疫苗   病毒囊膜   外源基因  

关键词： 日本血吸虫   遗传变异   基因多态性   基因工程疫苗  

摘要： 对日本血吸虫中国大陆株湖南、湖北、江西、安徽、四川、云南隔离群以及一个实验室传代品系从基因水平进行了多态性研究。首先，在用PCR-SSCP技术分析了285rDNA-D2高变区基础上，测定了该区安徽和云南隔离群的DNA序列；其次，用PCR获得了含有ITS的rDNA片段，并对其进行了酶切位点重复序列的多态性分析；最后，用RAPD技术分析了全基因组DNA的多态性。结果表明，安徽与云南隔离群的285rDNA-D2区序列仅有2个碱基的差异，碱基相同率达99．7％，大大高于与日本血吸虫菲律宾株的相同率87％，可以解释为什么7个隔离群D2区单链构象完全一致的原因；ITS的8种酶切图谱显示共有58条DNA片段，有差异者仅3条，占5．2％；对随机扩增的284个片段的分析显示7个隔离群的平均遗传距离D＝0．22，四川和云南间最小（D=0．13），安徽和云南间最大（D=0．3）。通过由点到面的研究及综合评估认为日本血吸虫中国大陆株虽然存在一定程度的点突变和多态性差异，但变异的程度较小，具有相对的遗传稳定性。由于我国血吸虫病流行区分布范围广，各地流行特点不尽相同，因此对日本血吸虫中国大陆株遗传变异的研究不仅有助于种下分类，更有利于流行病学研究及防治对策的制订。

关键词： 基因工程抗体   生物技术   抗体治疗  

摘要： 随着基因工程和蛋白质工程等生物技术在抗体研制领域的广泛应用,基因工程抗体的种类日趋多样化,构建日趋合理化,在体内的生物学效应也日臻完善,使之较天然单克隆抗体的治疗效果更好,范围更广.大量动物实验和初步临床试验结果令人振奋.基因工程抗体正从实验室走向临床,为一些难治性疾病提供了新的有效的治疗手段.针对多种疾病的基因工程抗体纷纷进入了Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期临床试验阶段,已有十几种抗体获得FDA批准.与传统的化学治疗相比,抗体治疗的缺点是价格昂贵和市场范围小,限制了其在商业上的发展.因此需要进一步的基础免疫学研究阐明抗体的作用机制;发展抗体制备技术降低抗体的生产成本;进行更广泛的临床试验来研究抗体及其复合物怎样应用才能最理想地提高疗效、降低毒副作用.

关键词： 伪狂犬病病毒   单克隆抗体   基因工程抗体   噬菌体展示   单链抗体  

摘要： 该研究的目的就是克隆抗伪狂犬病病毒抗体重链、轻链可变区基因,构建单链抗体基 因,利用噬菌体展示技术制备噬菌体抗体,并在大肠杆菌中进行可溶性表达,获得具有对伪狂犬病病毒结合活性的表达产物,为以后在治疗、预防上的应用奠定基础.将伪狂犬病病毒(北京分离株)利用蔗糖密度梯度离心纯化,免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细 胞融合,经间接ELISA筛选,有限稀释法三次克隆,获得了2株能稳定分泌抗伪狂犬病病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株1H7和3B5.从分泌具有中和活性的单克隆抗体杂交瘤细胞1H7中用异 硫氰酸胍裂解法提取mRNA,以此为模板反转录为cDNA第一链,采用RT-PCR以小鼠抗体重链可变区VH和轻链可变区VL特异性引物扩增VH、VL基因片段,经重叠引物延伸PCR(SOE-PCR)把VH与VL用编码(Gly<,4>Ser)<,3>连接肽序列的Linker连接成单链抗体ScFv基因,克隆入噬菌粒pCANTAB5E载体并转化***1感受态细胞,在SOBAG上筛选转化子,并用M13KO7超感染, 获得了抗伪狂犬病病毒噬菌体单链抗体文库.用阳性重组噬菌体感染不含琥珀抑制基因***菌株HB2151,经IPTG诱导,获得了可溶性表达的抗PrV单链抗体.表达产物经ELISA鉴定表明其具有与PrV结合活性.SDS-PAGE检测,在约30Kda处有一条新生带生成,与预期大小相符.

关键词： 伯氏疏螺体   ELISA   P39蛋白   莱姆病   基因工程抗原  

摘要： 目的 :利用伯氏疏螺旋体基因工程抗原P39建立间接ELISA法检测莱姆病特异性抗体IgG。方法 :基因工程抗原P39的包被浓度和酶二抗所用浓度及血清稀释倍数 ,均由棋盘试验确定 ,并进行了精密度 ,特异性试验 ,阻断试验 ,免疫复合物溶解试验 ,干扰试验。结果 :基因工程抗原P39最佳浓度为 2 0 0ng·ml- 1,用ELISA法鉴定 ,P39蛋白与两株P39单克隆抗体均发生特异性反应。测定 90例血清 ,其中 50例阳性 ,4 0例阴性 ,与进口试剂盒比较 ,两方法符合率 93.3% ,结论 :该方法特异性强 ,敏感性高 ,实验结果可靠 。