关键词:
猪囊虫病
基因工程疫苗
研制
免疫预防
免疫治疗
摘要:
从猪带绦虫六钩蚴 c DNA文库中筛选目的基因并进行克隆表达 ,重组抗原用血清学方法和猪体免疫试验进行鉴定 ,筛选保护性抗原基因。将具有免疫保护作用的重组抗原纯化 ,并与免疫刺激复合物佐剂结合 ,制成猪囊虫病基因工程疫苗。对工程菌的培养发酵、重组抗原的下游纯化及疫苗的配制、疫苗的中间试制进行了研究 ,确定了一套比较完善的生产工艺。应用昆明小鼠建立了猪囊虫病的实验动物模型 ,应用该模型进行上述疫苗的免疫预防试验 ,免疫 1次和 2次的免疫保护率分别为 96.9%和 98.4 %。本动物的免疫预防试验显示 ,疫苗安全性好 ,免疫保护率达 92 .2 % ,且免疫组发现的囊虫多数已死亡。在流行区进行了田间试验和区域试验。免疫猪未有不良反应 ,囊虫感染率分别由 2 0 %降为 1 .1 %和 5.4 %降为 0 .2 1 %。用该疫苗对人工感染的囊虫病猪进行免疫治疗 ,发现在感染早期的治疗效果较好。免疫动物的体液免疫和细胞免疫的检测结果显示 ,该疫苗刺激机体产生抗体的时间早、持续时间长、效价高 ;可显著提高淋巴细胞转化率及 E-RFC和 Ea-RFC细胞、ANAE+细胞和粗粒型 ANAE+细胞、抑制 /杀伤性 T细胞亚群的数量。以上结果表明 ,用大肠杆菌表达的重组抗原制备的猪囊虫病基因工程疫苗安全、高效 ,且成本低廉 ,可规模化生产 ,