关键词： 杆状病毒   昆虫细胞   流感病毒   基因工程抗体   分泌性表达   纯化   鉴定  

摘要： 将中和性流行性感冒 (流感 )病毒基因工程抗体IV 2、IV 6的轻链和重链Fd段基因 ,分别克隆入全抗体表达载体 pAC L Fc ,构建成杆状病毒表达载体pAC L Fc Ⅳ 2和 pAC L Fc Ⅳ 6 ,转染昆虫Sf9细胞 ,利用杆状病毒 /昆虫细胞系统实现抗体的分泌型表达 ,表达产物进行亲和层析分离纯化。SDS PAGE电泳和Westernblot法证实有完整免疫球蛋白的表达 ,免疫印迹法证实它们能与流感病毒血凝素蛋白特异性结合。经间接竞争性抑制ELISA法测定 ,抗体与流感病毒抗原结合的解离常数KD 值分别为 2 5× 10 -9M和 3 0× 10 -9M。流感病毒基因工程全抗体经在昆虫细胞中的表达、纯化和抗体特性鉴定 ,获得了两株纯化的全抗体 ,可用于以后的动物模型呼吸道粘膜被动免疫抗感染的研究。

关键词： 基因工程抗体   嵌合抗体   真核表达  

摘要： 抗体在疾病诊断、治疗和预防中发挥着重要作用。近几年来将基因工程应用到抗体生产的基因工程抗体技术发展迅速 ,本文就基因工程抗体中的重要组成部分———嵌合抗体的研究进展加以综述。

关键词： 基因工程抗体   抗体库   单抗   人源化  

摘要： 基因工程抗体可称为第三代抗体 ,其较前两代抗体有免疫原性低 ,用途多样等优点。其中抗体库技术又较另两种基因工程抗体 (嵌合抗体 ,改型抗体 )优越 ,可不经免疫制备抗体 ,又可实现完全人源化 ,理论上若构建出有足够库容量及多样性的抗体库 ,便可从中筛选任何抗原的单克隆抗体。该技术有可能取代杂交瘤技术。本文综述了抗体库技术的产生 ,发展 。

关键词： 作物   真菌病害   抗病育种   基因工程育种   抗真菌蛋白基因   几丁质酶   病程相关蛋白   抗真菌多肽  

摘要： 自从人类栽培农作物以来,真菌病害一直是造成作物减产降质的一个主要原因,它占总病害的80%以上.传统的抗病育种因其周期长、耗时费力,远不能满足生产需要.化学农药因其污染环境及食物链,加之病原菌的快速变异,防治真菌病害效果受到限制.所以,运用基因工程技术来改良植物抗病性已成为新的研究热点.有关植物-病原微生物互作机制的研究表明,植物有许多诱导防卫机制,可表现出多种多样的生理生化抗菌途径.抗真菌蛋白(antifungal proteins,AFPs)的产生和积累是一种主要的防卫反应.这些蛋白质对真菌的生长有直接或间接的抑菌效应,所以基于AFPs的抗真菌蛋白基因工程策略已成为培育作物广谱抗性的一种有效方法.

关键词： 非侵袭性基因疗法   血脑屏障   基因工程抗体  

关键词： 基因工程疫苗   科学院   上海   专家   生命   家畜   传染病   农畜   传染性疾病   疾病   鼻病毒   口蹄疫病毒   国家科学技术委员会   国家科委   重大突破  

摘要： 复旦大学生命科学院郑兆鑫教授和上海农科院徐泉兴研究员等科研人员经过10多年的协作攻关,在口蹄疫基因工程研究领域获得重大突破.

关键词： 角蛋白   人源性抗体   Fab   制备   鉴定   基因工程技术  

摘要： 目的　用基因工程技术制备人源性抗角蛋白抗体Fab片段 ,并对其纯度、抗原结合活性及特异性等进行鉴定 .方法　将从半合成噬菌体抗体库中成功地筛选到的特异表达抗角蛋白 Fab片段的阳性克隆转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达 ,产物经金属鏊合层析纯化 ,并用 EL ISA鉴定抗原结合活性和特异性、SDS- PAGE鉴定纯度和蛋白印迹检测抗角蛋白抗体 Fab片段识别的抗原组分 .结果　可溶性表达的抗角蛋白抗体 Fab片段经金属鏊合层析可有效地纯化 ,蛋白印迹明确纯化产物为人 Fab片段 .所纯化的 Fab片段在非还原 SDS-PAGE中形成 Mr5 0× 10 3单一条带 ,在还原 SDS- PAGE中可见 Mr 2 3× 10 3,Mr 2 5× 10 3两条带 .EL ISA和 Western blot证实该片段具备良好的抗原结合活性和抗原特异性 .结论　成功表达并鉴定了人源性抗 Mr 4 8× 10 3角蛋白的 Fab可溶性片段 ,为人源性抗角蛋白抗体工程化、进一步研究该抗体的生物活性并提高其临床应用价值奠定了良好的基础 .

关键词： 大肠杆菌K88   猪腹泻   双价基因   基因工程疫苗   免疫效果   保护性抗原   高密度培养   生产工艺   适宜培养基   中国农科院  

摘要： 中国农科院哈尔滨兽医研究所的科研人员利用现代基因工程技术手段,人工构建出非产肠毒素性且具有K88 K99两种保护性抗原的大肠杆菌菌株,通过接种于适宜培养基发酵高密度培养,成功试制出了新生猪腹泻大肠杆菌K88 K99双价基因工程疫苗。该疫苗于1990年荣获中国农科院科技进步一等奖,其生产工艺及免疫效果处于国内同类产品领先水平。

关键词： 抗猪O型口蹄疫基因工程疫苗   抗原蛋白   保护效力   动物保护  

关键词： CD3   CD20   基因工程抗体   双特异性抗体   B细胞   恶性肿瘤   治疗  

摘要： 目的　研究抗CD3 抗CD2 0双特异双链抗体的生物学活性。方法　采用亲和层析法纯化本室构建的抗CD3 抗CD2 0双特异双链抗体可溶性表达产物 ,并用SDS PAGE ,Westernblot和分子排阻层析鉴定纯化产物 ;采用FACS法和玫瑰花环试验测定纯化产物与靶细胞的结合活性 ;采用3 H TdR掺入实验和51 Cr释放试验测定该双特异双链抗体的生物学性质。结果　纯化的抗CD3 抗CD2 0双特异双链抗体具有与Jurkat(CD3+)和Daudi细胞 (CD2 0 +)的结合活性 ,且能同时与Jurkat和Daudi细胞结合形成玫瑰花环 ,并能竞争性封闭亲代鼠源性抗体HIT3a和HI47与Jurkat和Daudi细胞的结合位点 ;该双特异双链抗体具有促有丝分裂原作用和介导激活的T细胞杀伤Daudi细胞的活性。结论　抗CD3 抗CD2 0双特异双链抗体具有与亲代鼠源性抗体HIT3a和HI47相同的性质 ,且能介导激活的T细胞杀伤表达CD2 0抗原的肿瘤细胞 ,是一个有望用于B细胞恶性肿瘤临床治疗的双特异性抗体。