关键词： 乳球菌   疫苗级表达载体   TA4抗原基因   基因表达   基因工程疫苗   乳链菌肽抗性菌株   DNA序列   艾美耳球虫  

摘要： 为了构建疫苗级显性标记载体,该研究利用乳链菌肽（Nisin,一种由某些乳球菌产生的高效、无毒的天然食品防腐剂）作为选择压力,以乳链菌肽抗性作为显性选择标记来构建乳球菌疫苗级表达载体,来弥补现有载体的不足.同时,组建基因工程乳球菌,为重组乳球菌表达外源基因的研究奠定基础.利用乳链菌肽抗性菌株中乳链菌肽抗性和乳糖发酵（Nis<'r>Lac<'+>）紧密连锁的原理,在含有乳链菌肽、乳糖和溴甲酚紫的选择培养基上,从新鲜的205份牛奶样品中定向筛选乳链菌肽抗性菌株.以柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因为例来检测所构建表达载体的性质.根据已发表的球虫TA4基因序列设计特异性引物,并在引物的两端分别加上Kpn I和Sac I作为插入的酶切位点,将TA4基因克隆到表达载体pMG36n中,电穿孔法转化乳酸乳球菌,获得有TA4抗原活性的乳酸乳球菌工程菌,对该菌的表达产物用SDS-PAGE检测,结果表明表达产物的蛋白分子量为25KDa,与预期结果相同.以刚出壳的健康雏鸡为试验对象,用上述表达球虫TA4基因的工程乳球菌口服雏鸡10天,之后进行人工感染球虫试验,一周后宰杀,通过试验鸡体重、粪便中卵囊数、盲肠病变记分、盲肠卵囊数和抗球虫指数等指标进行评价,结果抗球虫指数为160.12,达到良好水平.

关键词： 肝炎病毒   基因工程疫苗   hepatitis viruses   病毒性肝炎   体液和细胞免疫应答   分子生物学技术   血源性疫苗   治疗疾病   预防   表达抗原   基因导入   细胞内   特异性   接种者   制造   运输   体内   工艺   感染   纯化  

摘要： 0 引言DNA疫苗就是将编码抗原的基因导入到体内,细胞内表达抗原,诱导特异性体液和细胞免疫应答,进行预防和治疗疾病的一种分子生物学技术.传统上用于预防病毒性肝炎的疫苗为血源性疫苗和近几年来发展的基因工程疫苗.前者如未完全纯化,则有可能使接种者感染病毒性肝炎.而后者工艺复杂,难度大,成本高,运输不便.故而人们希望找到一种新的安全有效、制造简便、廉价的疫苗.

关键词： 转基因   研究与开发   品种培育   基因工程育种   耐盐碱   基因转移   研究与发展   转基因杨树   林草  

摘要： 日前,科技部正式启动了转基因林草新品种培育与示范研究项目,并面向全国有关科研单位进行招标。该项目旨在通过基因工程手段,培育出高抗、优质林草新品种,为我国退耕还林(草)等生态工程建设提供保障,为提高我国林草生物技术研究的整体水平及创新能力奠定基础。该研究包括抗虫转基因杨树的研究与开发,优质、高产抗干旱、耐盐碱杨树基因工程育种研究,优质、杂种落叶松抗干旱基因工程育种研究,抗干旱、耐盐碱基因工程黑麦草、早熟禾新品种培育,抗干旱、耐盐碱基因工程麻黄新

关键词： 水稻   转基因株系   纹枯病抗性   几丁质酶活力  

摘要： 鉴于前人对转导靶基因植株的纹枯病抗性均是早期分离世代或离体鉴定得到的结果，鉴定方法存在一定的局限性。本文以不同转化事件形成的高世代纯合株系为材料，研究转导几丁质酶基因和β-1，3-葡聚糖酶基因对提高纹枯病抗性的效果，结果表明： (1)对感病品种“七丝软占”转导外源RC24和β-1，3-Glu基因后，不同转化事件形成的株系间，纹枯病抗性存在极显著差异，呈抗病、中抗、中感、感病等不同类型。但92.1％的株系表现为中抗或中感，表明转导目标基因可能仅起到部分提高抗性的作用。同一转化子内不同转基因系间有时抗性也会存在差异，说明基因转化过程中存在一定程度的嵌合现象。 (2)大部分转基因株系的农艺性状未发生变化，但部分株系表现为生育期延长，株高、千粒重增加，表明转基因过程存在着丰富的组培变异，为进一步的选择改良提供了基础。 (3)选择抗感不同类型的转基因株系，接菌诱导几丁质酶活力，结果表明各株系几丁质酶活力与纹枯病抗性基本呈现一致性。感病品种“七丝软占”、感病对照Lemont接菌诱导后其内源几丁质酶活力上升幅度较小，转导外源几丁质酶基因后，靶基因的组成性表达可掩盖或抑制内源几丁质酶活力表达，使其表现为接菌诱导与非接菌诱导几丁质酶活力无明显差异。而抗病对照“奇妙香”接菌诱导后内源几丁质酶活力上显著上升，但仅与中等抗性的“七丝软占”转基因株系相当，表明几丁质酶基因是防卫基因的一部分，接菌诱导后整个防卫系统的高水平表达才是奇妙香具有良好抗性的真正原因。 (4)转基因株系在不同时间及不同空间叶位检测，其几丁质酶活力均 扬州大学硕士学位论文 无明显差异，表明靶基因的组成性表达，而抗病对照和感病对照，其内源几 丁质酶活力在诱导后呈动态变化，均在接菌诱导后72h达到高峰;不同空I’0] 叶位叶片几丁质酶活力表现无差异，表明病原菌侵染信号对迅速传导性，从 而激活植物本身的防卫系统，在全株表现为对病害的一定抗性。

关键词： 单克隆抗体   出版   基因工程抗体   细胞与分子免疫学杂志  

关键词： 幽门螺杆菌   重组腺病毒载体   抗原表位   疫苗   尿毒酶B   热休克蛋白A   空泡毒素蛋白A   毒素相关蛋白A  

摘要： 通过初步评价纯化重组ureB和hspA质粒在小鼠的免疫效果.表明二者均能刺激机体产生抗UreB和HspA的IgG.在此基础上,将ureB-hspA融合基因成功构建到腺病毒载体上,检测结果表明该重腺病毒具有侵染真核细胞能力.且能在真核细胞中表达目标抗原;以血清中IgG,肠液和新鲜粪便中sIgA,细胞因子IFN-γ和IL-5为指标,评价其免疫效果,结果显示该重组腺病毒载体双价疫苗能在小鼠体内激发细胞免疫和体液免疫.并筛选出以10<'7>病毒滴度,鼻饲方式,加强免疫一次的最适免疫方案;通过建立Hp感染的小鼠动物模型,进一步评价其免疫保护效果.结果显示,与对照组相比,经重组腺病毒免疫后的小鼠每克胃组织中Hp菌数下降了62.12﹪（546.667比1.443.333）Hp菌数占总菌数的百分比下降75.82﹪（9.41﹪比38.92﹪）.说明重组腺病毒双价疫苗能大大降低Hp在小鼠胃内的定植,增强了小鼠的免疫保护作用.该论文对新型疫苗和载体在预治幽门螺杆菌感染上进行了探索性研究.所得到的重组腺病毒双价疫苗和抗原表位显示出有良好的前景.

关键词： 生长激素释放因子   动物育种   ONA   基因工程疫苗   畜牧生产   农业生产   生物技术   领域  

摘要： 生物技术主要包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程等。随着重组DNA技术的发展,生物技术产品已经进入动物生产、饲料工业等领域中,并在控制畜禽疾病、饲料作物改良、提高畜禽生产力等方面发挥越来越大的作用。生物技术的应用必将使畜牧业发生巨大变化,对提高畜禽的生长和生产性能,提高产品质量,减少疾病的发生,改善环境污染,充分

关键词： 单克隆抗体   基因工程抗体   免疫学家  

摘要： 由著名微生物学家和免疫学家汪美先教授、金伯泉教授主编的《单克隆抗体手册》一书，自20世纪90年代初出版以来，得到了国内同行的大力支持和有关公司好评。该书的出版对于免疫学及生命科学中单克隆抗体的深入研究，对于交流信息、加强协作和促进开发应用起到了较好的甚至不可替代的作用。

关键词： 马立克氏病   基因工程疫苗   免疫效力   现状   发展趋势   鸡  

摘要： 本文对MD基因工程疫苗中的重组亚单位疫苗、基因缺失苗、基因疫苗和重组活病毒载体疫苗的研究现状作一综述,并重点介绍了重组活病毒载体疫苗。结合其他疫苗的研究方法,可从鸡痘病毒载体插入部位的选择、增加外源基因的表达产量、使用多个抗原表位构建多价重组基因工程疫苗、使用两种病毒载体构建的重组病毒二次免疫、共表达细胞因子或细胞表面受体、表达微基因等方面来增强重组鸡痘病毒活病毒载体疫苗的免疫效力。

关键词： 乙型肝炎   基因工程疫苗   疱疹反应  

摘要： 1病历摘要 患者1,男性,36岁.患者2,女性,32岁,系患者1之妻;患者3,男性,8岁,系患者1、2之子.三人于1999年10月17日上午来该站门诊在上臂三角肌接受乙肝基因工程疫苗注射,每剂10μg/ml.该疫苗由中国预防医学科学院北京华尔盾生物技术公司生产,批号为990301,10月20日下午,全家三口人均出现全身散在性水痘样疱疹,边缘红润,触痛,稍硬,并发痒.体检发现,患者1、2全身疱疹个数较少,在5个～7个之间,患者3双上肢及胸部疱疹多见,约有20个,疱疹表面高出皮肤,大小如豆状,中心苍白色.