关键词： 棉花   侧根   高效转化系统   基因工程育种   外植体   农杆菌介导  

摘要： 利用陆地棉 (Gossypium hirsutum ***-er3 1 2和 ***.晋棉 7号 ,冀合 3 2 1 ) 8～1 2 d无菌苗侧根 1 0 mm切段作为新的外植体与农杆菌 L BA440 4 p BK9(3 5 s∶∶ LUC∶∶ Nos)共培养将外源基因导入棉花 ,成功的获得转基因工程植株 ,提高了愈伤组织和转基因工程植株的转化效率。 p BK9质粒上携带的萤光素酶基因 [Lucif-erous(lux) ]为报告基因 (reporter gene) ,新霉素磷酸转移酶基因 (npt II)为选择标记基因 (markergene) ,经选择获得的转基因工程植株通过 VedioImage System进行整株活体萤光素酶基因 (lux)活性表达检测 ,获得 To 代和 T1代萤光素酶基因(lux)阳性表达植株。进行 DNA分子杂交 (South-ern blot)分析 ,证明外源基因已经整合到棉花基因组中。转基因工程植株萤光素酶基因 (lux)和新霉素磷酸转移酶基因 (npt II)在自交后代中得到保持 ,外源基因呈核基因单一位点显性遗传。

关键词： α毒素   单链抗体   基因表达   生物学特性   基因工程菌株  

摘要： 将 2种抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体 (ScFv)基因ScFv 2E3和ScFv 1A8分别克隆至表达质粒pUC119,pET 2 0b ,pET 2 8a和pHOG2 1中 ,构建了重组质粒 ,分别转化至相应的受体菌JM10 5 ,BL2 1(DE3)和XL1 BLUE中 ,得到表达ScFv的重组菌株。ELISA和SDS PAGE分析检测表明 :经IPTG诱导后所表达的ScFv目的蛋白主要形成了包含体的形式 ,但也有少量ScFv存在于重组菌株的培养上清和胞周质中。经薄层扫描分析 :重组菌株XL1 BLUE (pHOG 2E3)的蛋白表达产物分别占菌体可溶性蛋白的 4% ,重组菌株XL1 BLUE (pHOG 2E3)的蛋白表达产物占菌体总蛋白的相对含量为 2 2 % ,其相对分子量约为 31ku。表达的ScFv蛋白不但具有中和卵磷脂酶的活性 。

关键词： 转基因植物   基因工程疫苗   生产方法   开发前景   可食性  

摘要： 对转基因植物生产疫苗的方法进行了介绍 ,概括了转基因植物疫苗的主要优点和存在的问题 ,总结了 10年来转基因植物疫苗的研究进展 ,并对未来的发展方向进行了讨论。

关键词： 大肠杆菌K99   插入序列   基因同源性   抗原决定簇   模拟   中国QH株   菌毛   fanC   基因工程疫苗   亚单位   基因克隆   测序  

摘要： 目的 构建大肠杆菌K99菌毛表达载体。方法 通过逐级亚克隆的方法克隆k99菌毛形成亚单位基因（fanC），并进行序列测定和fanC亚单位的抗原决定簇模拟，以确定突变部位。结果 克隆了包括K99菌毛形成亚单位基因（fanC）和部分fanD基因在内的一段基因，该基因与国外报道相比明显偏大。序列测定表明：在fanC尾部多出 24bp，在fanC与 fanD，的结合部有一 800bp左右的新基因。经与基因库中大肠杆菌基因作同源性比较发现，该新基因为768bp的插入序列IS1。其他基因为K99自身fonC与fanD片段之间的过渡基因。IS1的插入未改变fanD，基因的阅读框架，只是使fanD片段末端增加了 8个氨基酸。fanC亚单位的抗原决定簇模拟结果显示，K99 fanC片段具有一个非常突出的亲水区域，根据经验它应是抗原决定簇所在的部位。结论 首次发现大肠杆菌K99基因中含有插入序列IS1。

关键词： 鹅副粘病毒   HN基因   克隆   序列分析   RT-PCR   基因工程疫苗  

摘要： 以鹅副粘病毒GPVSF0 2毒株的基因组RNA为模板 ,通过RTPCR方法扩增出HN基因片段 ,然后将其克隆至T载体中。经PCR鉴定后 ,对阳性克隆进行测序 ;测序后拼接得出HN基因的全序列。经分析HN基因编码区核苷酸序列 ,所测GPVSF0 2毒株与参考毒株NL 96核苷酸序列的同源性为 86 %。

关键词： 分离株   研究进展   基因工程疫苗   形态特征   动物医学   免疫   畜牧兽医学院   预防兽医学   生物学特性   人兽共患病  

摘要： S852.12 20020544野母鸭生殖器官的解剖观察/金光明(安徽技术师范学院 233100),李家如,姜云立∥安徽农业技术师范学院学报.-2001,15(2).-39～40,51研究了野母鸭生殖器官的形态特征。试验应用10只成年野母鸭,放血致死后,标本用10%福尔马林溶液固定。

关键词： 乙型肝炎病毒表面抗原   基因表达   基因工程疫苗   HBV   HBSAG  

摘要： 在乙肝病毒 (HBV)的结构蛋白中 ,与疫苗有关的主要是HBsAg。HBsAg基因已在不同的生物体系中获得成功的表达 ,其基因工程疫苗的研究也取得了长足的进展 。

关键词： 鸡   球虫病   免疫接种   活疫苗   基因工程疫苗   应用  

摘要： 2.2活苗 2.2.1强毒苗强毒苗是直接从野外分离的强毒株研制而成的.一般研制方法是:先从自然发生球虫病的病鸡体内或粪便中采用饱和盐水漂浮法收集球虫混合卵囊,然后采用单卵囊分离法分离并增殖各种艾美尔球虫卵,再按一定比例混合,并配以适当的稳定剂,即组成一种活苗.强毒苗的免疫原理是球虫在低水平感染时不会使鸡发病,但能刺激机体产生免疫力以抵抗再感染,其免疫效果取决于接种的卵囊数量及方式.连续低剂量卵囊免疫(即涓滴免疫)与同样数量卵囊的一次性免疫相比,诱发的免疫力明显增强.由于强毒苗是由各种鸡球虫的强毒株混合组成,如应用不当,会引起球虫病的爆发,或少数鸡因免疫剂量不够而仍对球虫敏感.

关键词： 抗体   基因工程   双特异抗体   设计   应用  

摘要： 目的　综述基因工程抗体的研究进展 ,为此领域的研究提供参考。方法　根据国内外文献 ,结合作者近年的研究 ,较全面地介绍基因工程抗体的各种设计思路 ,总结各种设计方法的特点 ,并分析基因工程抗体的临床应用现状。结果和结论　基因工程抗体药物的研究正方兴未艾 ,已有一批抗体药物进入临床应用 。

关键词： 胶质瘤   抗体   基因工程   制备  

摘要： 目的 构建并高效表达抗胶质瘤单链抗体（ScFv）,为基因工程双功能抗体及免疫毒素的制备奠定基础。方法 以抗胶质瘤杂交瘤细胞重、轻链可变区基因构建ScFv基因,并克隆人pET-20b表达载体,在大肠杆菌BL21 DE3中诱导表达,以Western印迹及酶联免疫吸附测定（ELISA）检测表达产物。结果 测序证实基因构建正确,表达产物相对分子质量（Mr）为28000,表达量占菌体总蛋白的15.0％,且保留了胶质瘤相关抗原的特异结合活性。结论 初步得到有活性的胶质瘤ScFv,为脑肿瘤的分子导向诊治提供了新的选择。