关键词： 微藻油脂   藻株培育   生物质能源   胁迫培养   诱变技术   基因工程育种   资源化培养  

摘要： 微藻油脂作为一种潜在的可再生能源和生物燃料资源，在解决能源危机及促进绿色发展方面具有重要意义。藻种特性影响微藻培育、油脂提取和转化等多个环节，选择适宜的原始藻株进行定向育种，有望突破生产过程中总体油脂产率偏低的瓶颈。胁迫培养通过改变微藻的外部生长条件来引起其内部生理和代谢变化，从而促进油脂的积累，本质上是利用微藻自身的应激性反应，需要在油脂积累和生长平衡之间找到最佳点。诱变技术通过物理或化学手段引起微藻细胞损伤，本质上是一种外应力作用下的随机突变，需要从中筛选出具有优良性状的突变株。基因工程育种通过分子生物学手段，定向改造微藻的基因组，具备高精度、高成本和高复杂性。探索高脂藻株培养与资源化理念的结合，可以实现更经济环保的生物质能原料微藻生产模式，推动生物质能产业发展。论文概述了微藻油脂合成的机理及其调控策略，总结了促微藻产油的培育方法，包括胁迫、诱变、基因工程及高脂藻株与资源化生产的联动，强调培育高脂藻株对于实现可持续生物燃料生产的重要作用。通过列举各培育手段在当前微藻油脂高产研究的技术重点和作用机理，说明了当前微藻产油的研究方向和瓶颈，未来的研究可能致力于产油微藻油脂代谢调控网络的发掘完善、高通量育种方法的创新及资源化培养体系的优化。

关键词： 幽门螺杆菌   脲酶   全人源化单域抗体   基因工程   AI辅助分子改造  

摘要： 为了构建针对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)脲酶的单域抗体的基因工程表达系统。首先利用Pymol、ITASSER和ClussPro2等AI辅助工具分析比较了不同抗体与Hp脲酶亚单位B(UreB)之间的分子间作用力,确定了VL全人源化单域抗体UreBAb作为重点研究对象。根据大肠埃希菌密码子偏好性优化了UreBAb基因序列,并将其分别插入pET28a、pE-SUMO等表达载体,转化大肠埃希菌Rosetta(DE3)获得了重组表达菌株,通过IPTG诱导制备重组抗体蛋白,并利用提取的Hp脲酶作为抗原,分析验证了重组表达抗体的活性。SDS-PAGE检测结果显示UreBAb和SUMO-UreBAb均获得了正确的表达,纯化后的蛋白产率分别为0.34和0.41 mg/mL。单向免疫扩散实验结果证实这两种重组表达抗体均与Hp UreB抗原具有良好的亲和力,对脲酶的抑制率分别为51.27%和74.07%。进而,结合AlphaFold2、cluspro2、mCSM-AB、OSPREY和FoldX等人工智能工具,评估分析了影响抗原-抗体复合物稳定性的关键位点及其突变策略,随后进一步构建了9个UreBAb进化突变体表达菌株,活性分析结果显示,这些突变体与抗原的结合活性均得到了提高,其中以I107W突变体的活性提升最为显著,相较于野生型UreBAb,提高了24.95%。本研究为Hp全人源化单域抗体的开发奠定了良好的基础。

关键词： 家禽   基因工程疫苗   亚单位疫苗   重组活病毒载体疫苗   反向遗传技术改造的疫苗   核酸疫苗  

摘要： 家禽作为重要的动物性食品来源,其健康问题对人类社会和经济发展至关重要。疫苗作为预防家禽疫病的有效手段之一,在保障禽类健康和促进畜牧业发展方面发挥着至关重要的作用。本文综述了家禽用亚单位疫苗、重组活病毒载体疫苗、反向遗传技术改造疫苗和核酸疫苗的开发和应用。基因工程疫苗通过递呈病原体的特定免疫原成分,提供安全有效的免疫保护,克服了传统疫苗的局限性。基因工程疫苗在家禽疫病防控中将发挥越来越重要的作用,为畜禽业健康发展和公共卫生安全提供有力保障。

关键词： TP53单克隆抗体   抗体,单克隆   基因工程抗体技术   载体构建   免疫组织化学  

摘要： 目的:利用基因工程抗体技术制备TP53重组抗体,并进行临床病理诊断应用的初步探究。方法:将杂交瘤来源的TP53单克隆抗体重链及轻链可变区基因分别与pGEM-T载体连接,测序分析并选择有效重链及轻链序列分别与pFUSEss-CHIg-mG2B、pFUSE2ss-CLIg-mk及pcDNA3.4载体连接。利用ExpiCHO-S™Expression System进行真核表达,经Protein A柱纯化获得TP53重组抗体。最后将TP53重组抗体和商品化TP53抗体进行蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)和免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)应用的初步探究。结果:通过抗体表达纯化获得TP53重组抗体,液相色谱-质谱测定结果显示TP53轻链/重链分子量分别为25 kDa和53 kDa,ELISA效价为1∶2180000,亲和力测定Ka值为6.6×10^(10) L·mol^(-1)。WB结果显示TP53重组抗体与商品化TP53抗体表达结果一致。IHC结果显示TP53重组抗体和商品化TP53抗体识别靶标均定位于细胞核,在人肾癌、人乳腺叶状腺癌、人乙状结肠腺癌及小鼠肝癌中的检测结果一致,且TP53重组抗体在人高分化鳞癌、人肝细胞癌和人乳腺癌中的免疫组化检测效果优于商品化的TP53抗体。结论:本研究成功制备了小鼠抗人TP53重组抗体,并为临床病理诊断提供初步的数据支持。

关键词： 口腔颌面部   人民卫生出版社   免疫治疗   基因工程抗体   口腔肿瘤   出版发行   免疫机制   免疫调节  

摘要： 书籍名称:口腔临床免疫学实验技术主编:陈万涛出版日期:2023年11月出版社:人民卫生出版社内容简介:本书主要介绍口腔免疫学领域,根据近年来国内外免疫学及口腔免疫学的基础和临床研究的最新成果编写而成。全书编写内容循序渐进,分别为口腔免疫学基础知识,口腔及口腔颌面部常见的免疫反应性疾病的免疫机制及特点,病毒免疫和基因工程抗体,口腔主要免疫系统和特点,口腔肿瘤免疫和免疫治疗。

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)   基因工程疫苗   感染性克隆   外源基因  

摘要： 自美国(1987年)和欧洲(1990年)首次分离猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)以来,该病毒在全球流行已超过30年。直至今日,PRRSV仍然不断变异和进化,在我国的流行态势尤其复杂,在后非洲猪瘟时代仍然是影响养猪业的最具经济意义的病原体之一。目前,市售疫苗包括传统灭活病毒疫苗(KV)和改良活病毒疫苗(MLV)。然而,PRRSV的疫苗预防和控制尚未完全实现。当前迫切需要开发一种安全、有效、通用的基因工程疫苗。基于PRRSV感染性克隆反向遗传平台表达外源基因,包括标记基因、免疫增强基因或其他病毒抗原基因,构建重组PRRSV疫苗、基因缺失疫苗、广谱通用疫苗等成为了研究的热点。在此,我们综述了近年来PRRSV作为病毒活载体表达外源基因的研究进展及其在新型基因工程疫苗开发中的潜在应用前景。

关键词： 口腔颌面部   人民卫生出版社   免疫治疗   基因工程抗体   口腔肿瘤   出版发行   免疫机制   免疫调节  

摘要： 书籍名称:口腔临床免疫学实验技术主编:陈万涛出版社:人民卫生出版社出版时间:2023年11月内容简介:本书聚焦口腔免疫学领域,根据近年来国内外免疫学及口腔免疫学的基础和临床研究的新进展新成果编写而成。全书编写内容循序渐进,分别为口腔免疫学基础知识,口腔及口腔颌面部常见的免疫反应性疾病的免疫机制及特点,病毒免疫和基因工程抗体,口腔主要免疫系统和特点,口腔肿瘤免疫和免疫治疗,黏膜免疫和免疫调节,免疫检查点和免疫治疗等内容。

关键词： 肌酸激酶同工酶CK-MB   急性心肌梗死   基因工程抗体  

摘要： 目的 构建异源二聚体CK-MB重组蛋白并制备其特异性基因工程抗体,以此作为CK-MB定量检测试剂盒的诊断原料,从而辅助临床急性心肌梗死的早期诊断,提高诊断的准确性。方法 通过共表达载体获取异源二聚体CK-MB并进行动物免疫,从而获取小鼠浆细胞;进一步使用单细胞光导系统分离抗原特异性小鼠单个B细胞,并通过单细胞PCR获取抗体轻重链的可变区基因序列后构建基因工程抗体。基于初步的功能验证筛选出候选抗体,并进一步通过棋盘滴定法探究最佳的配对方案,并利用双抗夹心ELISA原理初步组装CK-MB定量检测试剂盒。结果 成功获取CK-MB免疫原;通过单B细胞光导技术筛选出CK-MB抗原特异性小鼠单个浆细胞并制备出2株小鼠源基因工程抗体,且均具有识别天然CK-MB的能力;经由双抗夹心ELISA法筛选出两种配对方案,其拟合曲线的R~2均大于0.99。结论 成功制备出靶向CK-MB的小鼠源基因工程抗体,经由ELISA初步验证抗体的特异性和亲和力,为进一步开发高特异性、高灵敏度的CK-MB新型定量检测试剂盒奠定了坚实基础。

关键词： 肉牛产业   育种进程   育种周期   优质育种   优良性状   畜群   畜种   遗传改良  

摘要： 一、肉牛育种的意义肉牛育种对肉牛产业的发展和进步具有非常重要的意义。肉牛育种的目的是通过选择和统计等手段选育出带有优良性状的畜群,增加养殖效益和市场竞争力。育种的成果可以起到很大的引导作用,促使养殖户更加倾向于购买和饲养性状更加优良的牲畜,同时也促进产业进步和发展。通过遗传改良和优质育种可大大加快畜种的育种进程,大幅缩短育种周期,为肉牛产业的进步和发展提供了更有力的保障。

关键词： 基因工程疫苗   疫病防制   基因缺失疫苗   现代生物科技   免疫效果   传统疫苗   基因工程亚单位疫苗   重组活载体疫苗  

摘要： 随着现代生物科技的发展,基因工程疫苗在畜禽疫病防制领域发挥着重要的意义。与传统疫苗相比,基因工程疫苗具有更高的安全性、稳定性和免疫效果好的特性,被广泛应用于畜禽疫病防制中。本文主要论述基因工程亚单位疫苗、重组活载体疫苗、基因缺失疫苗和核酸(DNA)疫苗在疫病防制中的具体应用,以期为我国畜牧业的健康发展提供有益的参考和借鉴。