关键词： 分泌型乙型肝炎病毒   包膜M蛋白   毕赤酵母中   表达   高拷贝重组质粒   包膜中蛋白   分泌表达   基因工程疫苗  

摘要： 将乙肝病毒包膜中蛋白M基因插入酵母整合型表达质粒pAO818的醇氧化酶 (AOX1)启动子下游 ,构建携带 8拷贝M表达盒的重组载体 ,经电穿孔转化SMD116 8菌株和G4 18筛选 ,得到了高效分泌表达M蛋白的毕赤酵母菌株 ,表达量超过 5 0mg L .经初步纯化 ,对表达产物的性质鉴定表明 ,重组蛋白具有preS2和S抗原性 ,可以形成颗粒 ,并具有一定程度的糖基化 .所构建的稳定重组菌株和所得到的重组蛋白颗粒 ,为进一步研究新一代的疫苗提供了必要的材料 .

关键词： 基因工程   疫苗   感染性疾病疫苗   肿瘤疫苗   避孕疫苗  

摘要： 疫苗(vaccine)是通过诱发机体产生特异免疫反应以预防或治疗疾病,或达到某一医学目的的一类生物制剂.其主要组分是能够刺激机体产生特异免疫反应的抗原,这些抗原可以是完整的病原微生物,如:细菌、病毒或完整的机体细胞,也可以是它们的某些成分或与这些成分的抗原性相似的其他抗原.

关键词： 种子蛋白质基因工程   分子育种   品质改良   农业生物技术  

摘要： 本世纪全世界将面临三大不可逆转的压力,这就是人口递增、粮食消耗量增加和农田耕地面积减少.

关键词： 基因工程疫苗   病毒疫苗   传统疫苗   新型疫苗   亚单位疫苗   遗传工程疫苗   控缓释   细菌疫苗   预防对象   抗独特型抗体疫苗  

关键词： 腐蹄病   C型节瘤拟杆菌   纤毛蛋白   基因工程疫苗   家兔   免疫试验  

摘要： 将转化 C型节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因表达子粒的工程菌 PAK/ 2 pfs C在含羧苄青霉素营养肉汤培养基中培养 ,用 Mg Cl2 法在培养物上清中提取表达产物 (纤毛蛋白 )。将表达的纤毛蛋白产物用弗氏完全佐剂乳化 ,制成疫苗。用疫苗免疫 3只健康家兔 ,2 1 d后再次接种 ;定期采血 ,用对流免疫电泳和 K凝集实验检测试验家兔的体液免疫应答及抗体水平。结果发现 ,免疫 7d即可产生相应抗体 ,2 1 d后抗体效价达到 80 0 0×以上 ,而且高滴度抗体可维持 6个月以上。试验表明 ,腐蹄病

关键词： IL-2Rα   基因工程抗体   Fab   基因表达  

摘要： 目的：构建和表达抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab片段，并测定该抗体片段的生物学活性。方法：采用连续PCR方法构建抗人 IL-2Rα抗体 Fab克隆载体5G1-pA22，并通过限制性酶切反应将抗人 IL-2Rα抗体 Fab基因从克隆载体 5G1-pA22重组人表达载体pET-28b，并在大肠杆菌BL21（DE3）中用IPTG诱导以包含体形式高效表达，该表达产物约占菌体蛋白20％以上。经超声破碎、洗涤、变性和复性后，采用双抗体夹心ELISA法及体外抗体竞争抑制试验鉴定表达产物的生物学活性。结果：抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab成功构建，并以包含体形式表达，表达产物的产量达1mg/ml。双抗体夹心ELISA法试验表明抗体 Fab段与 IL-2Rα有特异的结合能力，体外抗体竞争抑制实验表明 Fab段可桔抗 IL-2与活化T细胞表面 IL-2Rα有特异的结合，抑制T细胞活化，增殖，抑制率达90％以上。结论：成功地构建了抗人IL-2Rα抗体Fh段，并获得高效表达，其具有较好的生物学活性。

关键词： 应用   草坪草   基因工程   育种   遗传转化  

摘要： 综述草坪草的遗传转化和基因工程在草坪草育种上的应用。

关键词： 角蛋白   人单克隆抗体   亲和力   噬菌体抗体库   基因表达  

摘要： 目的　制备亲和力高、性能良好的人源性抗角蛋白抗体。方法　以人表皮角蛋白为抗原从噬菌体抗体库中克隆特异性抗角蛋白抗体 ,采用链替换 (chain shuffling)技术对所获抗体进行亲和力成熟 ,并对其生物学性能进行一系列鉴定。结果　经过筛选半合成噬菌体抗体库 ,成功获得了能与角蛋白特异性结合的人源性抗角蛋白抗体 ;选择其中活性最好的一株抗体 ,通过轻链替换和重链替换使抗体亲和力得到了有效提高 ,达到8× 10 1 0 mol的理想水平。结论　用基因工程的方法可以制备高质量的人源性抗角蛋白抗体 。

关键词： 肝炎病毒/免疫学   肝炎抗体   遗传工程  

摘要： 0 引言乙型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎分别是由乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的世界性传染病[1-10].HBV、HCV感染不仅引起急性、慢性病毒性肝炎,而且与肝硬化和肝细胞癌的发生和发展密切相关[11-20].流行病学调查表明,HBV感染的阳性率为10%,抗-HCV的阳性率为3.2%,对我国人民健康危害极大.因此,急需研究有效的针对乙型、丙型病毒性肝炎的防治措施.其中肝炎病毒人源化基因工程抗体及其应用是目前的主要研究方向之一.

关键词： 腐蹄病   节瘤拟杆菌   纤毛蛋白基因   绵羊白细胞介素2基因   基因工程疫苗   免疫  

摘要： 根据腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因 (Pili基因 )序列 ,在 Pili基因 6 19bp Ehe 酶切位点上插入绵羊白细胞介素 - 2基因 (Ovi IL- 2基因 ) ,构建了 Pili基因与 Ovi IL- 2基因的融合基因表达载体。先用 Eco R 、Bam H 双酶切p Bluescript- Ovi IL - 2重组质粒 ,获得两端具有 Eco R 、Bam H 位点的 Ovi IL - 2基因片段 ,用 Klenow补平后 ,与经Ehe 酶切后的重组质粒 PME2 90 - Pili进行平端连接 ;转化 JM10 5感受态细胞 ,筛选阳性克隆 ,分别用 Bam H 、Eco R 、Xba 、Bgl 、Pvu 等进行酶切鉴定。然后将阳性重组质粒转染 BL - 2 1表达宿主感受态细胞 ,用 0 .1m ol/ L Mg Cl2沉淀法和超声波裂解法提取 BL- 2 1表达 Pili基因与 Ovi IL- 2基因融合基因表达蛋白。对流免疫电泳对重组融合蛋白的特异性分析证明 ,融合蛋白主要在宿主菌体中表达 ;SDS- PAGE电泳结果表明 ,重组融合蛋白分子大小约为 330 0 0 ,表达产物的量约占菌体的 5 .49%。