关键词： 基因工程单链抗体   传染病   应用   研究进展  

摘要： 单链抗体是一种基因工程小分子抗体,基本结构为V_H-linker-V_L或V_L-linker-V_H。单链抗体由于具有很多与单克隆抗体或其他基因工程抗体不同的特点,已在临床诸多疾病的诊断、治疗和预防等方面显示出重要的价值。本文就单链抗体在传染病中的应用研究进展作了综述。

关键词： 马立克氏病   常规疫苗   基因工程   基因缺失疫苗   基因重组活载体疫苗   养禽业  

摘要： 马立克氏病(MD),是由马立克氏病毒引起的淋巴增生性疾病,病毒经空气传播,传染力强,被感染鸡产生肿瘤和死亡,造成巨大经济损失.MD是危害养禽业最为严重的传染病之一.目前,该病的控制主要依靠疫苗免疫.

关键词： 猪霍乱沙门氏菌   ColE1型质粒   Ⅲ型分泌系统   口蹄疫病毒   VP1基因   多肽疫苗  

摘要： 该文分为四章：第一章：2株A型口蹄疫病毒VP1基因的序列分析.从西北边镜地区得到2株A型口蹄疫病毒,采用一步法分离了RNA,利用RT-PCR方法扩增了712bp的DNA片段.第二章：抗A型口蹄疫病毒重组多肽疫苗的研究.根据已经得到的A型FMDV的VP1基因序列及国际上公认的抗病毒中和表位,并结合我们对口蹄疫病毒的研究成果,设计了A型FMDV的重组多肽疫苗.第三章：以减毒猪霍乱沙门氏菌为受体的抗O型口蹄疫病毒重组活菌疫苗的初步研究.将含有口蹄疫病毒的疫苗基因的原核表达质粒pXZ84和真核表达质粒pBO1经过中间宿主鼠伤寒沙门氏菌LB5010后电转化到减毒的猪霍乱沙门氏菌C500中,构建成抗O型口蹄疫病毒重组活菌苗pXA84/***和pBO1/***,经验证后两种质粒均能在C500中稳定存在.第四章：一个猪霍乱沙门氏菌质粒pSFD10的序列和特征分析.从猪霍乱沙门氏菌减毒株C500中分离到一个大小为4091bp质粒.

关键词： 单克隆抗-D   新生儿溶血病   基因表达   Rh血型  

摘要： 该课题的研究内容包括三部分：①抗-D单克隆抗体的研制及其应用.②抗-D抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达.③完整人抗-D抗体分子表达功体的构建.一、抗-D单克隆抗体的研制及其应用;二、抗-D抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达;三、完整人抗-D抗体分子表达载体的构建.小结：1、用EB病毒转化分泌抗-D抗体的人B淋巴细胞,经抗体筛选及细胞克隆后在国内首次建立了6D、8C、8H3株分泌抗-D抗体的细胞株,6D细胞分泌的为lgM抗体,抗体效价为1:64,8C、8H为lgG抗体,抗体效价分别为1:64和1:128.用这些单克隆抗体与国外进口的单克隆抗-D及人源性多克隆抗-D平行检测1000例献血员的(D)血型,结果符合率为100%.2、用RT-PCR法扩增6D细胞株的Fab段,克隆测序后,构建表达抗-D抗体可溶性Fab段的原核表达载体,并于大肠杆菌MLl-Blue表达了具有抗原结合特性的Fab段抗体分子.3、在国内外首次从引导区设计扩增抗-D抗体可变区基因的引物,并成功地扩增了带引导序列的抗-D抗体可变区基因.4、构建了表达人完整抗-D抗体分子的真核表达载体,国内外少见文献报道.

关键词： 嵌合抗CD20抗体   片段F(ab')2   基因工程抗体   B-淋巴细胞   B淋巴细胞瘤   治疗  

摘要： 目的 :为了简化生产步骤 ,提高抗体蛋白的生物活性 ,探索在工程菌体内直接进行抗CD2 0F(ab’) 2 的高效率分泌性表达。方法 :采用单因素考察法优化培养条件 ,使蛋白G柱和S2 0 0 HR分子筛柱分离纯化目的蛋白 ,用MTT法检测抗CD2 0F(ab’) 2 抑制Daudi细胞体外生长的活性。结果 :发现用论文所选定的最适培养条件 ,抗CD2 0F(ab’) 2 的产量有了明显提高 ,从1 9～ 2 .2mg L达到了 3 7～ 4 3mg L ,F(ab’) 2 在表达产物中所占的比例也从 9 7%～ 13 2 %提高到了 38 1%～ 4 6 8% ;使用S2 0 0 HR分子筛柱对蛋白G柱亲和纯化后的产物进一步分离纯化 ,可以使F(ab’) 2 的纯度达到 85 %以上 ;MTT法检测结果证明F(ab’) 2 抑制Daudi细胞生长的IC50 值为 14 6 μg ml,而Fab’为 39 5 μg ml。 结论 :实现了抗CD2 0F(ab’) 2 在工程菌体内的高效率分泌性表达 ,而且所表达的抗CD2 0F(ab’) 2 比抗CD2

关键词： 核苷酸序列分析   轮状病毒   保护性抗原   VP4基因   基因克隆   RT-PCR   非细菌性腹泻   基因工程疫苗  

摘要： 用反转录聚合酶链式反应 (RT- PCR)技术 ,从轮状病毒感染的细胞中扩增了 816 bp的 VP4片段中抗原表位区。通过 T4 DNA连接酶将其直接连接于克隆载体质粒 p GEM- T上 ,转化至受体菌 DH5 α中。提取质粒经 PCR扩增、酶切鉴定 ,证明重组质粒 p T- V4中含有轮状病毒的 VP4基因片段。经核苷酸序列分析 ,表明克隆了轮状病毒主要保护性抗原

关键词： 公共信息资源   p185   人源化设计   基因工程抗体   计算机模拟   抗体人源化   计算机辅助分子设计  

摘要： 通过计算机辅助分子设计的手段 ,综合序列分析和结构分析的结果对抗体的结构完成了计算机模拟 ,并对其进行了人源化的模建和改造 ,从而建立了一套快速可行的抗体人源化设计方案 .对一株抗p1 85neu/Her 2 单克隆抗体进行了克隆测序 ,并采用此方案进行了人源化设计 .此设计方案完全使用可公共访问的生物信息学工具和数据库 ,具有良好的实用性和推广价值 .

关键词： 马立克氏病病毒   糖蛋白B抗原   重组鸡痘病毒   基因克隆   马立克氏病   基因工程疫苗  

摘要： 通过PCR方法扩增了马立克氏病病毒 (MDV) 2 .8kbgB基因 ,并且在其两端加上PstⅠ和NotⅠ酶切位点。然后用PstⅠ /NotⅠ酶切回收 gB片段 ,插入到转移载体 pEFgpt12s复合启动子Spromoter的下游的PstⅠ /NotⅠ酶切位点处 ,构建了转移质粒pEFgpt12s gB。将该质粒与鸡痘病毒 (FPV)野毒 2 82E4株共转染鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,通过MXHAT选择培养基进行筛选 ,蚀斑纯化 ,经PCR扩增证实重组病毒中含有 gB基因。重组病毒和FPV野毒在CEF上形成空斑大小无明显差别 ,病毒效价分别为 10 -5.43 TCID50 /mL和 10 -6TCID50 /mL 。

关键词： 生长抑素   基因工程   疫苗   大鼠生长   免疫  

摘要： 以生长抑素基因工程疫苗免疫离乳大鼠和 12 0 g左右大鼠 ,结果该疫苗能明显促进 12 0 g左右大鼠的生长 ,但对离乳大鼠没有明显效果。 2组处理均发现 ,大鼠血清生长激素水平显著升高 ,但是前者血清 IGF- 1水平没有出现明显变化。结果提示 ,生长抑素基因工程疫苗的促生长作用与动物的生长周期密切相关 ,而且这种状况很可能由 IGF- 1水平所决定。该疫苗免疫大鼠引发诸多免疫指标的改变 ,推测生长抑素基因工程疫苗通过调节激素变化间接地影响了动物的免疫功能。

关键词： 生物技术育种   落叶果树   组织培养   诱变育种   基因工程育种  

摘要： 现代生物技术如胚培养、离体诱变、基因工程技术等为果树育种开辟了一条新途径,它不仅可以定向改良果树遗传性状,而且扩展了育种范围,提高了育种效率。根据有关文献综述了落叶果树胚胎培养育种、胚乳培养育种、花培育种、离体诱变育种、原生质体培养与细胞融合、基因工程育种所取得的成绩,侧重介绍了胚培、花培、离体诱变及原生质体培养与细胞融合4种育种方法及其培养技术,初步分析了目前落叶果树生物技术育种中存在的问题,并对今后的工作重点提出了建议。