关键词： 噬菌体抗体库技术   高通量筛选   基因工程抗体   蛋白质组学  

摘要： 噬菌体抗体库技术是组合技术与基因工程抗体技术相结合的产物 ,为快速筛选特异性抗体提供了简便而高效的操作系统 ,随着蛋白质组学的飞速发展 ,对抗体的大规模制备的需求日益增加 ,迫切需要发展高质量的抗体库和与之相整合的高通量筛选技术。近年来 ,以上技术的发展和自动化设备的引入为大规模抗体制备的实现提供了条件 ,对这一领域的研究进展做一概述。

关键词： 鞭毛蛋白   membrane proteins   外膜蛋白   致病性   基因工程疫苗   组分疫苗   致病机理   宿主免疫   结构特征   钩体疫苗   钩体菌株   蛋白组分   新疫苗   钩体病   开发   基础   分布   纯化   白参  

摘要： 　　钩体外膜蛋白(outer membrane proteins,OMPs)与鞭毛蛋白参与钩体与宿主作用,在引起宿主免疫和致病中发挥着十分重要的作用.因此研究致病性钩体OMPs与鞭毛蛋白的结构特征以及在不同钩体菌株中的分布,对于研究钩体病的致病机理和开发、研制高效钩体疫苗有重要意义.同时,寻找致病性钩体共有的外膜蛋白与鞭毛蛋白组分,发展纯化组分疫苗和基因工程疫苗,是研发新疫苗的基础.……

关键词： 细菌   活载体   疫苗   重组DNA技术   基因工程疫苗   抗原  

摘要： 随着重组DNA技术的发展和应用 ,基因工程疫苗的研究取得了快速的进展。其中 ,最有发展前景的研究领域之一 ,是以细菌为活载体的疫苗。细菌活载体疫苗的优点 ,可将保护性抗原在细菌的质粒、基因组的某些部位或细菌表面表达。

关键词： 猪瘟   病毒   野毒株   E2基因   克隆   核苷酸序列   氨基酸序列   同源性   重组DNA   载体   基因工程疫苗  

摘要： 用RT PCR方法扩增了陕西省近期猪瘟流行野毒株E2基因 ,并将其克隆到 pMD 18 T载体 ;经转化、筛选、鉴定后 ,测定了核苷酸序列 ,根据C株、Brescia株和Alfort株确定起始氨基酸三联体的正确位置后进行 gp5 5氨基酸序列推导 ,并进行同源性比较。结果表明 ,该猪瘟流行毒株的E2核苷酸序列与C株、Brescia株和Alfort株的E2核苷酸序列同源性分别为 81.9%、83.4 %和83.5 % ;相应地 ,gp5 5氨基酸同源性分别为 94 .8%、95 .6 %和 95 .3%。将此E2基因亚克隆到杆状病毒转移载体 pFastBacHTb后获得了重组质粒 pFBHT E2 ,进而转化入含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中 ,发生转座作用 ;经抗性及蓝白斑筛选得到了含E2基因的重组DNA ,将其命名为rBacmid E2。此研究为进一步在昆虫细胞中表达E2基因、开发研制猪瘟基因工程疫苗奠定了基础。

关键词： 花卉   基因工程育种   花期   花色   花型   株型   研究进展  

摘要： 花卉育种是花卉业发展的基础。不断成熟的基因工程技术解决了传统育种工作中不能突破的问题 ,其优点在于可有目的地改变花卉的某一性状而不影响其它性状 ,并缩短育种周期 ,为花卉的性状和品质改良提供了全新的思路和手段。近年来 ,花卉基因工程育种一直是花卉育种研究的热点。目前的花卉基因工程已在植物花期、花色、花型、株型等方面取得了重要进展。本文就近年来与花卉基因工程相关的研究与应用进行综述 ,同时简单评述了花卉基因工程育种研究中存在的问题并展望其应用前景。

关键词： 传染性喉气管炎病毒   鸡痘病毒   抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗   同居感染试验   免疫接种  

摘要： 疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后攻击传染性喉气管炎WG株强毒和鸡痘102株强毒,疫苗免疫鸡全部获得保护,而非免疫鸡则全部发病。在试验动物饲养场的自然条件下,将免疫鸡和试验对照两组鸡饲养在同一个鸡舍内,让疫苗毒的传播更接近自然条件。在每个月的攻毒试验中,对照鸡都没有获得对鸡痘和传染性喉气管炎强毒的保护。在疫苗免疫期间进行连续5个月的跟踪检测,同居未免疫鸡没有检测到抗传染性喉气管炎病毒gB抗体。这些实验结果表明抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗不能通过接触传播。

关键词： 基因工程   改形抗体   老鼠   重组抗体片段   转基因动物   噬菌体抗体   转基因植物  

摘要： 目的 :了解新一代抗体的研究状况。方法 :通过计算机数据库检索相关文献 ,作出综合评述。结果 :利用基因工程技术制备的抗体为新一代的抗体 ,包括人源化的鼠源性抗体、重组抗体片段、转基因动物抗体、植物抗体和噬菌体抗体。结论 :基因工程抗体在疾病的诊断和预防 ,特别是治疗方面有广阔的应用前景。

关键词： 基因工程抗体   酶联免疫吸附测定   Ⅰ型粘蛋白   制备   生物学活性  

摘要： 目的 :制备Ⅰ型粘蛋白 (MUC1 )基因工程单链抗体 (scFv) ,并对其生物学活性进行初步研究。方法 :提取纯化MUC1单链抗体原核表达质粒C31 ,使用酶切和PCR鉴定 ;采用HRP标记的抗ETag单克隆抗体进行Westernblot,筛选表达量高的菌落 ,大量扩增后 ,制备培养上清及胞周质中抗MUC1scFv;将MUC1高表达的SKOV3细胞铺于 96孔板 ,戊二醛固定后作为包被抗原 ,将制备的抗MUC1scFv抗体倍比稀释后利用ELISA方法检测其生物学活性。结果 :质粒C31经Sfil酶切后为 530 8bp,经Sfil、NotⅠ双酶切后为452 2bp和 786bp,PCR扩增片段为 1 0 75bp。Westernblot结果显示可溶性抗体为 30kD。选择表达量高的菌落 ,进行大量扩增、诱导表达、提取培养液上清及胞周质可溶性抗体 ,胞周质抗体水平明显高于培养液上清 ;利用SKOV3作为包被抗原进行ELISA ,当培养液上清1 :32、胞周质 1 :2时所测OD值最高。结论 :抗MUC1单链抗体表达于细菌的胞周质液和培养液上清 ,以胞周质液表达量最高 ;且制备的抗MUC1单链抗体有生物学活性。噬菌体表面呈现技术可大量制备人MUC1噬菌体基因工程单链抗体 。

关键词： 牛皮蝇   Hypodermin   A基因   基因克隆   基因表达   皮蝇蛆病   基因工程疫苗  

摘要： 参照牛皮蝇HypoderminA(HA)基因的核苷酸序列,设计一对引物,以皮蝇总RNA为模板进行RT--PCR扩增牛皮蝇HA基因,将扩增基因进行克隆测序。序列分析表明,所克隆获得的基因与GenBank中已经登录的核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.2%和99.3%。同时,将该基因与表达载体PGEX-4T-1连接,构建并获得阳性重组表达载体。

关键词： 鸡球虫   基因工程   疫苗   保护性抗原   细胞免疫  

摘要： 近年来 ,应用鸡球虫基因工程疫苗预防球虫病的试验报道逐年递增 ,许多保护性抗原陆续被发现。各种研究结果表明 ,动物机体的抗球虫免疫以细胞免疫为主 ,因此能否诱导机体产生细胞免疫是判定虫体蛋白能否作为重组疫苗成分的标准之一 ;此外 ,研究结果也显示 ,孢子或裂裂子生殖阶段的部分抗原可以诱导机体产生抗球虫免疫 ;抗有性生殖阶段抗原的抗体也可以减少攻虫雏鸡的排卵囊量。虽然在试验条件下 ,重组基因工程疫苗可以减轻球虫感染所造成的病理损伤或者减少卵囊在体内的繁殖数量 ,但距离应用于生产还相差较远 ,因此仍然有必要对相关的一系列问题进行更加详细和更深一层的研究 。