关键词： 布鲁氏菌病   致病机制   免疫机制   基因工程疫苗   人畜共患病  

摘要： 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属的细菌引起的人畜共患传染病 ,目前布鲁氏菌属的细菌主要有七个种。随着分子生物学技术的发展 ,对布鲁氏菌的致病机制在分子水平上有了更进一步的理解 :布鲁氏菌自身一些与致病有关的基因使得布鲁氏菌逃避了巨噬细胞的杀伤作用 ,在巨噬细胞内存活和定居。在布鲁氏菌病免疫过程中 ,先天性免疫应答主要通过补体、巨噬细胞、天然杀伤细胞来参与 ,获得性免疫应答中 ,CD4+ 、CD8+ 、rδT细胞起很重要的作用。文章围绕这些与致病、免疫有关的基因及参与免疫反应细胞的研究进展进行了探讨 ,可为今后进行布鲁氏菌病预防及开发新型基因工程苗提供理论依据。

关键词： 肝癌   基因工程   嵌合Fab   抗体   原核表达载体   大肠杆菌   基因疗法  

摘要： 目的　分别在大肠杆菌中高效表达嵌合Fd及嵌合轻链 ,并进行嵌合Fab复性的研究。方法　分别将嵌合Fd及嵌合轻链基因插入到原核表达载体pET32a中 ,构建成重组载体pET32a/cFd和pET32a/cL。转化大肠杆菌后诱导其表达。大量制备表达的嵌合Fd及嵌合轻链后 ,按二者绝对量等摩尔比混合后进行透析复性。然后 ,分别利用SDS PAGE、Westernblot和ELISA进行分析和鉴定。结果　成功获得了嵌合Fd及嵌合轻链的原核非融合高效表达 ,表达蛋白相对分子质量 (Mr)均在 2 4×10 3 左右。表达量分别约占菌体总蛋白的 2 8.3%和 32 .3% ,2种目的蛋白均主要以不溶性的包涵体形式存在。另外 ,嵌合Fd与嵌合轻链在缓慢透析的条件下成功地复性为嵌合Fab抗体 ,Mr 约为 4 2×10 3 ,具有特异性抗原结合活性和良好的亲和力。在起始总蛋白浓度为 10 0 μg/ml时 ,复性效率约为4 9 %。结论　成功实现了嵌合Fab抗体的高效表达及高效复性 。

关键词： 肿瘤疫苗   肿瘤免疫   树突状细胞   基因工程疫苗   抑癌基因  

摘要： 上世纪80年代以后,有关肿瘤疫苗的各种研究呈现阶梯状上升趋势,肿瘤疫苗在现代肿瘤治疗中作为肿瘤术后、化疗、放疗的一种重要的辅助治疗手段越来越受到人们的关注。尽管对大多数人体肿瘤而言,肿瘤疫苗研究目前尚未取得突破性进展,但肿瘤疫苗在许多动物肿瘤模型实验及少数人类肿瘤前期临床实验中,已取得了可喜的甚至非常令人鼓舞的成绩。本文就肿瘤疫苗研究概况、研究动向及研究进展作简单综述,重点讨论肿瘤逃脱宿主免疫防御功能的可能机制及肿瘤疫苗诱导抗肿瘤免疫机制的分子机理,并对目前尚存在的问题作讨论分析。

关键词： 动物基因工程疫苗   伪狂犬病病毒   阿氏病病毒   猪伪狂犬病  

关键词： 降解生物   微生物降解   基因工程育种   土壤板结   大学专家   微生物菌群   大分子物质   杨谦   优良菌株   日卜  

摘要： 哈尔滨工业大学专家采用基因工程育种方法,构建具有优良性状的微生物降解群落,把秸秆降解成生物有机肥,在创造经济效益的同时,缓解了因施用化肥造成的土壤板结。目前。

关键词： 甲肝病毒   基因工程   杆状病毒   肝炎抗体   全抗体分子  

摘要： 目的　探讨人源抗甲型肝炎病毒全抗体分子在杆状病毒中的表达。方法　将获得的人源抗甲肝病毒中和性抗体Fab段基因克隆入含信号肽及Fc的杆状病毒表达载体中并在杆状病毒细胞中表达。结果　获得了中和性人源抗甲肝病毒全抗体分子的表达产物并进行了纯化 ,轻重链表达产物位置大小正确 ,HAFc16抗体能与具有中和活性的鼠抗甲肝病毒单克隆抗体产生竞争抑制反应 ,并能在体外中和甲肝病毒 ,另一株HAFc78抗体同样具有体外中和甲肝病毒的活性 ,但系抗不同位点的抗体。结论　获得的人源抗甲肝病毒全抗体分子表达产物具有很好的体外中和甲肝病毒的活性 ,且为抗不同位点的抗体 ,为这些抗体的进一步开发及应用打下了基础 ,为防止甲型肝炎暴发流行提供应急措施。

关键词： 猪   传染性胸膜肺炎   放线杆菌   apxⅡ^-/Amp^r突变株   基因构建   基因工程疫苗  

摘要： 根据已发表的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清5型核苷酸序列设计并合成了一对引物,从自行分离的APP菌株PCR扩增apxⅡCA基因,将该片段与pBluescriptSK(+)载体连接,得到质粒pSK CA。另外,从质粒pIC neo中得到的Ampr基因经XbaⅠ酶切消化后,克隆到pSK CA中的XbaⅠ位点,获得了重组转移质粒pSK CAmpr。pSK CAmprDNA通过电转化导入亲本菌,电转化后的产物涂布于TM平板,可获得突变株。提取突变株和亲本菌基因组DNA,用PCR检测含有apxⅡC基因的胸膜肺炎放线杆菌染色体区域。从突变株基因组DNA扩增得到的一条PCRDNA片段比从亲本菌基因组DNA扩增得到的一条DNA片段大1 3kb,增大的片段与所插入的Ampr基因大小相符合。用合成的Ampr基因引物从突变株基因组DNA中也能扩增到一条1 3kb的特异性DNA片段。同时South ernblot鉴定有特异性带。这表明我们所构建的突变株是成功的。测定了突变株的遗传稳定性及突变株对动物的安全性,为进一步研究用其它报告基因置换Ampr基因后,研制单基因工程疫苗及以APP毒力缺失突变菌株为载体,表达外源基因的APP基因工程菌的研究奠定了坚实的基础。

关键词： 皮肤科   应用   治疗用抗体   基因工程抗体   作用机制  

摘要： 抗体治疗是一种疗效高、特异性强的治疗手段 ,随着基因工程抗体的出现和技术日益成熟 ,越来越多的治疗用抗体逐步由实验研究走向临床应用。简要综述了治疗用抗体的作用机制及其治疗银屑病、结缔组织病。

关键词： 单克隆抗体   ScFv   P糖蛋白  

摘要： 目的 :构建表达抗PgpScFv,进行体外活性的测定。方法 :利用RT PCR方法 ,克隆抗Pgp杂交瘤细胞PHMAO2的重链可变区基因 (VH) ,轻链可变区基因 (VL) ,拼接为单链抗体 (ScFv) ,再克隆到具有强启动子的PET2 8a(+)载体上进行表达 ,并进行了表达产物体外活性的测定。结果 :构建了表达质粒PET2 8a(+) ScFvPGP。表达产物可与表达Pgp抗原的K5 6 2 A0 2细胞特异性结合 ,并不抑制Pgp外排泵的功能。结论 :构建表达的抗PgpScFv只有针对Pgp抗原的识别功能 ,并无抑制作用 ,因此应用于人体后不会干扰正常细胞的排泄分泌功能 ,无论是作为靶向诊断治疗的载体还是作为双功能抗体的一臂 ,均具有广泛的应用前景。

关键词： 科技博览   新品种   蔬菜根结线虫   脂肪代用品   花绒坚甲   光肩星天牛   基因工程疫苗   香石竹   有机蔬菜   玉米淀粉