关键词： 白细胞介素-2   基因佐剂   乙型肝炎   基因工程疫苗   免疫保护力  

摘要： 目的研究白细胞介素-2基因佐剂对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响。方法利用分子生物学技术构建含IL-2基因的重组质粒pcDNA3.1/IL-2,经测序鉴定、碱裂解法大量提取及Sepharose4FF柱层析纯化,得到重组质粒pcDNA3.1/IL-2和pcDNA3.1/S,免疫豚鼠后,经ELISA检测豚鼠血清中抗HBsAg滴度,CTLL-2细胞株/MTT法检测IL-2活性。结果序列测定和分析结果表明重组质粒pcDNA3.1/IL-2构建正确。血清中抗HBsAg抗体滴度:铝佐剂+HBsAg组为2116mIU;IL-2+HBsAg组为1987mIU;质粒pcDNA3.1/IL-2+HBsAg组为2252mIU;质粒pcDNA3.1+IL-2+pcDNA3.1/S组为67·19mIU;质粒pcDNA3.1/S组为50·88mIU。重组质粒pcDNA3.1/IL-2免疫1周后,IL-2表达水平达高峰,以后逐渐降低,但1个月后IL-2水平仍高于空白对照组。对抗HBsAg抗体滴度和IL-2活性的检测结果进行统计学分析表明,各组间差异有显著意义(P<0·05)。结论IL-2基因佐剂可以增强乙肝重组疫苗和乙肝DNA疫苗的免疫效果。

关键词： 狂犬病毒糖蛋白   犬2型腺病毒   转移表达载体   E3区   基因工程疫苗  

摘要： 目的构建狂犬病毒糖蛋白基因-腺病毒E3缺失转移表达载体,并在MDCK细胞系统中高效表达。方法将含狂犬病毒SRV9株糖蛋白(Rgp)cDNA的pGT载体,经双酶切后回收Rgp基因片段,与经双酶切的真核表达载体pIRES1neo连接,得到pIRES1Rgp,再经双酶切后回收2623bp片段,与E3缺失载体pBE3L连接,得到含狂犬病毒糖蛋白基因-腺病毒E3缺失转移表达载体pBE3LCRgp,再转染MDCK细胞。结果pBE3LCRgp转染的MDCK细胞,经间接ELISA和间接免疫荧光法在其培养上清中均能检出Rgp的高效表达。结论已成功构建狂犬病毒糖蛋白基因-腺病毒E3缺失转移表达载体,并在MDCK细胞中高效表达。

关键词： E.coli   基因克隆   禽呼肠孤病毒   Western   蛋白   原核表达载体   基因表达产物   基因工程疫苗   PCR扩增   相对分子量   核苷酸序列   诊断试剂盒   法国番鸭   软件分析   高效表达   大肠杆菌   IPTG   基因片段   免疫原性   阳性血清   blot   同源性  

摘要： 应用RT2PCR扩增出番鸭呼肠孤病毒MW9710株的σC基因,序列分析表明σC基因核苷酸数为810bp,编码269个氨基酸,相对分子量为29.4ku,DNAstar软件分析MW9710株的σC核苷酸序列和法国番鸭呼肠孤病毒89026株有93%的同源性,而与禽呼肠孤病毒的同源性仅在21%～25%之间,表明番鸭呼肠孤病毒是一类不同于禽呼肠孤病毒的新病毒。将σC基因片段亚克隆到原核表达载体pET32a中,经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达,Western2blot进一步验证了表达产物与番鸭呼肠孤病毒阳性血清反应,表明σC基因表达产物具有免疫原性,为下一步研制番鸭呼肠孤病毒诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。

关键词： 禽流感   基因工程疫苗   核酸疫苗   反基因工程疫苗   防治  

摘要： 禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的禽类(家禽和野禽)的一种从呼吸系统到严重全身性败血症等的多种疾病综合症,该病毒属于正黏病毒科.该病被世界动物卫生组织(OIE)规定为A类传染病,也被我国列为一类动物疾病.

关键词： 新技术   病毒性肝炎   重组戊型肝炎疫苗   医药   基因工程疫苗   肝炎病毒   乙肝疫苗   临床试验   自主知识产权   分子病毒学  

摘要： 我国研制出戊肝疫苗有望成世界基因工程第2例光明日报记者马跃华报道:厦门大学福建省医学分子病毒学研究中心和养生堂北京万泰生物药业有限公司研制出我国第一种拥有核心自主知识产权的基因工程疫苗--重组戊型肝炎疫苗。日前,正式获准进入Ⅰ/Ⅱ期临床试验。该疫苗有望成为继乙肝疫苗之后,世界上第二个基因工程病毒疫苗。据介绍,戊型肝炎是乙肝和甲肝之外的又一种重要的病毒性肝炎,病原体为戊型肝炎病毒HEV。它主要经胃肠道传播,偶尔经输血传播,在临床症状上与甲肝相似,但它是所有病毒性肝炎中病死率最高的,

关键词： 羟基脂肪酸   叶绿体基因工程   长链   Southern   转基因烟草植株   电子显微镜观察   叶绿体转化   生物合成途径   基因枪转化法   叶绿体基因组   基因编码   表达载体   PHAs   微生物聚酯   磷酸转移酶   气相色谱法   叶片叶绿体   筛选标记   氨基糖苷  

摘要： 中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯.PHA合酶(PHAsynthase,由phaC基因编码)和3-羟酰基-酰基转移蛋白-辅酶A转移酶(3-hydroxyacyl-acylcarrierprotein-coenzymeAtransferase,由phaG基因编码)是mcl-PHAs生物合成途径中的关键酶.以aadA(氨基糖苷-3′-磷酸转移酶)基因做筛选标记,分别构建了含phaC2基因的单价叶绿体转化表达载体pTC2以及同时嵌合phaC和phaG基因的双价叶绿体转化表达载体pTGC.通过PDS1000/He基因枪转化法转化烟草,获得具有壮观霉素抗性的叶绿体型转基因烟草植株,PCR和SouthernBlot结果表明,外源基因确已整合进烟草叶绿体基因组中且基本达到同质化.气相色谱法检测转基因株系中的mcl-PHAs含量最高达4.8mg/g干重,合成的PHAs单体主要成分为3-羟基辛酸(3-hydroxyoctanoate,3-HO)和3-羟基癸酸(3-dydroxydecanoate,3-HD).透射电子显微镜观察到转基因烟草叶片叶绿体中确有PHAs颗粒累积.

关键词： 基因工程疫苗   技术体系建设   畜禽   国家“863”计划   鸡传染性法氏囊病   免疫能力   免疫佐剂   相关基因   疫苗研制  

关键词： 叶绿体基因工程   核转化   转基因植物  

摘要： 以叶绿体转化为主的叶绿体基因工程,与传统的基因工程技术细胞核转化相比,在外源基因表达水平和转基因植物安全性等方面有明显的优势,尤其是在控制转基因沉默和遗传稳定性方面,可以互补核转化带来的局限性。因此,叶绿体基因工程是一种很具有发展前景的植物转基因技术,并在未来工农业生物技术领域发挥重要作用。本文着重在叶绿体转化技术主要特点,应用领域及其未来的发展前景等方面进行了简单评述。

关键词： 基因工程抗体   肿瘤免疫治疗   基因工程技术   表达载体   基因重组   抗体分子   免疫原性   临床应用   分子量   可塑性  

摘要： 基因工程抗体是应用基因工程技术将肿瘤的抗体基因重组并克隆到表达载体中,在适当的宿主中表达并折叠成有功能的一种抗体分子.其具有分子量小、免疫原性低、可塑性强及成本低等优点.现对近年来研制的几种基因工程抗体的特性及临床应用作一综述.

关键词： 基因工程疫苗   禽类   鸡传染性法氏囊病   传染病   中国   湖北   鉴定   项目   自主知识产权   专家组  

摘要： 由长江大学承担的湖北省重点科技发展项目——“鸡传染性法氏囊病基因工程疫苗开发研究”项目历时5年攻关，研制出了我国首剂禽类传染病基因工程疫苗，近日经湖北省科技厅组织的专家组鉴定．认为该研究项目总体达到国际先进水平．拥有完全自主知识产权，具有重大意义和应用价值。